HiMedia M741-100G Основа агара для теста на ДНКазу без ДНК

Основа агара для теста на ДНКазу без ДНК HiMedia M741-100G используется для определения дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов. Среда предназначена для идентификации патогенных стафилококков и дифференциации видов Serratia при добавлении соответствующих компонентов.

Принцип измерения

Основа агара для теста на ДНКазу (DNase Test Agar Base) применяется для выявления дезоксирибонуклеазной активности микроорганизмов. При добавлении ДНК и индикатора бромтимолового синего среда позволяет одновременно определять активность фермента ДНКазы и способность микроорганизмов ферментировать маннит.

Триптон и соевый пептон обеспечивают необходимые питательные вещества. Деполимеризация ДНК (активность ДНКазы) может быть обнаружена двумя способами:

1. При отсутствии бромтимолового синего: поверхность среды заливают 1 N HCl; вокруг колоний с ДНКазной активностью образуются прозрачные зоны. При отсутствии активности формируется мутный осадок из-за реакции HCl с нуклеиновыми кислотами.
2. При использовании бромтимолового синего: вокруг колоний с ДНКазной активностью формируются жёлтые зоны.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,0 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 118–121 °C (давление $\approx$ 0,08–0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

1. Используйте чистые культуры микроорганизмов возрастом 18–24 часа.
2. Посейте исследуемый образец на подготовленную среду.
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.
4. Оцените изменение цвета среды вокруг колоний или проведите тест с 1 N HCl.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Цвет и вид: от кремового до жёлтого гомогенный сыпучий порошок
• Желирование: плотный гель (сопоставимо с 1,5 % агаром)
• Цвет и прозрачность готовой среды (с бромтимоловым синим): синий, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Культуральные характеристики

Результаты получены при добавлении 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа изолированных микроорганизмов из проб пищевых продуктов.

Ограничения:

• Тестируемые организмы должны находиться в чистой культуре и иметь возраст 18–24 часа.
• Результаты требуют подтверждения дополнительными идентификационными тестами.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, очки/щиток для лица) и соблюдать правила микробиологической безопасности.

Утилизация: все загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.