HiMedia M725-500G Основа аспарагин-желатин-лактатной среды

Основа аспарагин-желатин-лактатной среды HiMedia M725-500G для изоляции серобактерий. Применяется для исследования образцов почвы; вес упаковки составляет 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для выделения серобактерий (сульфатредуцирующих бактерий), в частности видов Desulfovibrio, которые являются облигатными анаэробами и способны быстро производить сероводород (H₂S).

Принцип измерения

В почве сера преимущественно находится в органической форме (в составе белков растительного и животного происхождения, протоплазмы микроорганизмов в виде серосодержащих аминокислот — цистина и метионина, а также B-витаминов). Процесс преобразования органически связанной серы в неорганическое состояние называется минерализацией и осуществляется микроорганизмами. В условиях отсутствия кислорода некоторые микроорганизмы производят сероводород из органических серосодержащих субстратов. Серобактерии используют неорганический сульфат в качестве окислителя, восстанавливая его до H₂S.

В составе среды:

• Аспарагин: служит источником азота, легкодоступным для обеспечения энергии и роста микроорганизмов.
• Соли: поддерживают рост микроорганизмов.
• Желатин: выступает в роли отверждающего агента.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 152,5 г основы в 1000 мл подогретой очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 5 г лактата натрия.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
4. Разлейте среду в пробирки или колбы.
5. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 116 °C (давление ≈0,07 МПа) в течение 15 минут.

Работа с образцами

• Тип образца: пробы почвы.
• Сбор и обработка проб почвы должны проводиться в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические свойства

• Внешний вид: гомогенный свободнотекучий порошок от почти белого до желтого цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставимый с 15,0% раствором желатина.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирке формируется в виде столбика).
• pH (15,25% водный раствор при 25 °C): 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 30 °C в течение 7 суток.

Дополнительные параметры

Ограничения и предостережения

• Из-за вариативности потребностей в питательных веществах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост на данной среде.
• Запрещается встряхивать пробирки или колбы после инкубации, так как в этом случае реакции разжижения желатина не будут зафиксированы.
• При работе с образцами и культурами необходимо соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре +15…+25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с образцами, подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.