Основа углеводного агара для дрожжей HiMedia M677

Питательная среда «Основа углеводного агара для дрожжей HiMedia M677» производства HiMedia — двухкомпонентный химически определённый агар в порошковой форме. Среда предназначена для оценки способности дрожжей утилизировать углеводы дисковым методом и требует раздельного приготовления компонентов A и B.

Назначение

Основа углеводного агара для дрожжей применяется для изучения способности дрожжевых грибов утилизировать углеводы с использованием углеводных дисков. При добавлении источника углерода среда также может использоваться для определения чувствительности к противогрибковым препаратам, когда требуется химически определённая среда.

Состав

Содержание компонентов приведено в граммах на литр.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления

Приготовление компонента A

1. Приостановите 40 г компонента A в 900 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунт-силы на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 12 мин.
4. Охладите до 50 °C.
5. В асептических условиях смешайте со стерильным раствором компонента B.
6. Непосредственно перед разливом чашек Петри добавьте 3 мл стерильной 5%-ной винной кислоты на каждые 100 мл полученной смеси.

Приготовление компонента B

1. Для получения оптимальных результатов приготовьте компонент B в концентрации 10×.
2. Приостановите 6,75 г компонента B в 100 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости подогрейте для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте раствор фильтрованием.
5. До использования храните приготовленный компонент B в холодильнике.

Принцип измерения и интерпретация

Основа углеводного агара для дрожжей представляет собой модификацию основы для дрожжей, разработанной Wickerham и Burton.

Исходная ауксанографическая методика, описанная Beijerinck, предусматривает нанесение небольших количеств сухих углеводов на поверхность синтетического агара с высокой концентрацией посевного материала. Рост вокруг углевода указывает на ассимиляцию сахара дрожжами в качестве источника углерода. Профиль утилизируемых углеводов называют ауксанограммой.

Альтернативный вариант методики предусматривает использование фильтровальной бумажной дисковой пластины, пропитанной углеводом, вместо нанесения сухого углевода.

Контроль качества

Внешний вид

• Компонент A: однородный, свободно текущий порошок от белого до кремового цвета.
• Компонент B: однородный, свободно текущий порошок от белого до кремового цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 4,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция и pH

Реакция указана для водного раствора компонента B с концентрацией 0,67 % масс./об. при 25 °C.

• Реакция среды, pH: 5,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 5,20–5,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25–30 °C в течение 6–7 суток.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

Храните обезвоженную среду и приготовленную среду при температуре 2–8 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Техническое отличие

Двухкомпонентная формула предусматривает отдельное приготовление агаровой основы и химически определённого раствора питательных компонентов с последующим асептическим смешиванием.