HiMedia M677-100G Агар с дрожжевым азотным основанием (Twin Pack)

Питательная среда HiMedia M677-100G Агар с дрожжевым азотным основанием (Twin Pack) — химически определённая порошкообразная среда для микробиологического анализа. HiMedia M677-100G применяют для оценки способности дрожжей усваивать углеводы методом углеводных дисков; хранение обезвоженной и приготовленной среды — при 2–8 °C.

Назначение

Агар с дрожжевым азотным основанием используют для оценки способности дрожжей утилизировать углеводы методом углеводных дисков. При добавлении источника углерода среда также может применяться для определения чувствительности к противогрибковым препаратам, когда требуется химически определённая среда.

Состав

Состав приведён для приготовления 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления

Часть A

1. Взвесьте 40 г части A и суспендируйте в 900 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 12 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях смешайте охлаждённую часть A со стерильным раствором части B.
6. Непосредственно перед разливом в чашки Петри добавьте 3 мл стерильной 5%-ной винной кислоты на каждые 100 мл смеси.

Часть B

1. Для получения оптимальных результатов приготовьте часть B в 10-кратной концентрации.
2. Взвесьте 6,75 г части B и суспендируйте в 100 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости подогрейте для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте среду фильтрованием.
5. До использования храните раствор в холодильнике.

Принцип действия и интерпретация

Агар с дрожжевым азотным основанием (Twin Pack) представляет собой модификацию среды с дрожжевым азотным основанием, разработанной Wickerham и Burton.

Исходная ауксанографическая методика, описанная Beijerinck, предусматривает нанесение небольших количеств сухих углеводов на поверхность синтетической агаризованной среды с высокой концентрацией посевного материала. Рост вокруг углевода показывает, что сахар ассимилируется дрожжами как источник углерода. Совокупность утилизируемых углеводов образует ауксанограмму.

В альтернативной методике вместо сухого углевода используют фильтровальные бумажные диски, пропитанные углеводом.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный, легко сыпучий порошок от белого до кремового цвета.
• Часть B: однородный, легко сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 4,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 0,67%-ного водного раствора части B при 25 °C:

• pH: 5,4 ± 0,2.

Значение pH

• Диапазон pH: 5,20–5,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25–30 °C в течение 6–7 суток.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения обезвоженной среды: 2–8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Методическое основание

Состав и применение среды основаны на методике оценки утилизации углеводов дрожжами с использованием ауксанографического подхода и углеводных дисков.agaan