Основа агара KG (для стимуляции спорообразования у бацилл HiMedia M658-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа агара KG (для стимуляции спорообразования у бацилл HiMedia M658-500G (уп/500 гр)» предназначена для быстрого и свободного спорообразования бацилл. Применяется для дифференциации Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis при исследовании изолированных микроорганизмов из пищевых образцов; для дифференциации используют хорошо изолированные колонии.

Назначение

Основа агара KG (Kim–Goepfert) с соответствующими добавками предназначена для стимуляции быстрого и свободного спорообразования Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis. Методика позволяет дифференцировать эти микроорганизмы по результатам микроскопического исследования окрашенных клеток и наличию эндотоксиновых кристаллов в спорулировавших клетках Bacillus thuringiensis.

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Bacillus cereus — грамположительная палочковидная бактерия с β-гемолизом, широко распространённая в природе и выделяемая из различных пищевых продуктов. Bacillus cereus относится к крупноклеточным бациллам группы I — видам с шириной клеток более 0,9 мкм, споры которых не вызывают заметного вздутия спорангия.

Основа агара KG, разработанная Kim и Goepfert и рекомендованная APHA, используется для стимуляции свободного образования спор у Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis в течение 20–24 ч инкубации. Получаемые признаки позволяют:

• подтверждать микроорганизмы, образующие зоны, как бациллы группы I методом микроскопического исследования;
• непосредственно дифференцировать Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis по визуализации эндотоксинового кристалла в спорулировавших клетках последнего вида.

Бациллы группы 2, включая продуцирующий лецитиназу Bacillus polymyxa, не способны образовывать лецитиназу в условиях ограниченного содержания питательных веществ, создаваемых основой агара KG. Пептон и дрожжевой экстракт поддерживают рост Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis. Активность лецитиназы проявляется в виде непрозрачной зоны вокруг отдельной колонии. Bacillus cereus устойчив к полимиксину B, который ограничивает рост грамотрицательных микроорганизмов. Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis дифференцируют методом микроскопического исследования окрашенных клеток; в спорулировавших клетках Bacillus thuringiensis выявляются эндотоксиновые кристаллы.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 19,53 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
6. Добавьте стерильное содержимое 2 флаконов восстановленной селективной добавки с полимиксином B FD003.
7. Тщательно перемешайте среду.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца

Изолированные микроорганизмы из пищевых образцов.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным методическим рекомендациям. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей практики микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым методическим рекомендациям.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для дифференциации на этой среде необходимо использовать хорошо изолированные колонии.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,8%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжевого цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется непрозрачный гель светло-оранжевого цвета.

Реакция среды

Реакция 1,95%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 30–35 °C в течение 24 ч с добавлением стерильной эмульсии яичного желтка FD045 и селективной добавки с полимиксином B FD003.

• Примечание: соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на маркировке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики