HiMedia M652-100G Агар с фенолфталеинфосфатом

Питательная микробиологическая среда HiMedia M652-100G Агар с фенолфталеинфосфатом — порошковый агар для выявления фосфатазоположительных колоний Staphylococcus aureus. Среда предназначена для идентификации коагулазоположительного Staphylococcus aureus; готовую среду хранят при 2–8 °C.

Назначение

Агар с фенолфталеинфосфатом рекомендуется для идентификации фосфатазоположительного Staphylococcus aureus.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 28,01 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Тщательно перемешайте и разлейте в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Бактерии рода Staphylococcus являются патогенами человека и других млекопитающих. Традиционно стафилококки разделяли на две группы по способности свёртывать плазму крови — по коагулазной реакции. Коагулазоположительные стафилококки включают наиболее патогенный вид Staphylococcus aureus.

Наличие стафилококков в поражённой ткани первоначально может быть заподозрено при исследовании прямого окрашенного по Граму мазка. Однако небольшое количество бактерий в крови не позволяет провести микроскопическое исследование и требует предварительного культивирования.

Фосфатаза рассматривается как фактор вирулентности S. aureus. Микроорганизмы вырабатывают кислую и щелочную фосфатазы; активность щелочной фосфатазы подавляется в присутствии неорганического фосфата в среде.

Агар с фенолфталеинфосфатом используется для идентификации фосфатазоположительных колоний S. aureus, являющегося коагулазоположительным патогенным штаммом.

Пептический перевар животной ткани и мясной экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, факторами роста и микроэлементами, необходимыми для роста Staphylococcus aureus. Фенолфталеинфосфат натрия служит субстратом для фермента фосфатазы. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Образование фосфатазы определяют по высвобождению фенолфталеина, которое проявляется изменением цвета среды. При добавлении щёлочи высвободившийся фенолфталеин придаёт среде ярко-розово-красную окраску.

Альтернативная методика определения фосфатазной активности

1. Выращивайте стафилококки в течение ночи при 37 °C на указанной среде.
2. Переверните чашку и налейте несколько капель раствора аммиака в крышку.
3. Положительную культуру определяйте по окрашиванию колоний в ярко-розовый цвет в течение нескольких минут.
4. Окраска вскоре исчезает.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет порошка: от кремового до жёлтого.

Состояние порошка: однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 2,8%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Контрольное значение pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Температура, указанная в карточке: 10–30 °C

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: ниже 30 °C
• Условия хранения: в плотно закрытой упаковке
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке