Основа угольного кровяного агара HiMedia M646-500G (уп/500 гр)

Элективная основа угольного кровяного агара HiMedia M646-500G (уп/500 г) производства HiMedia. Применяется для культивирования Bordetella pertussis при производстве вакцин и поддержания лабораторных стоковых культур; сертификат ФСЗ 2009/03706.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения и культивирования микроорганизмов рода Bordetella (B. pertussis, B. parapertussis, B. bronchiseptica и B. avium). Данные микроорганизмы являются облигатными аэробами с низкой метаболической активностью.

Для первичной изоляции B. pertussis требуется добавление активированного угля и 15–20 % крови для нейтрализации ингибирующих факторов роста. Угольный агар (по методу Mishulow, Sharpe и Cohen) может использоваться как замена агару Борде-Генгу. Компоненты среды (пептон, HM пептон B и дрожжевой экстракт) обеспечивают необходимыми питательными веществами, хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а растворимый крахмал и уголь нейтрализуют токсичные для Bordetella вещества, такие как жирные кислоты.

Среда также может применяться для культивирования и изоляции Haemophilus influenzae при добавлении конской крови. Для подавления сопутствующей назофарингеальной флоры в среду добавляют пенициллин и диамидо-дифениламин дигидрохлорид.

Область применения

• Клинические образцы: мазки из носоглотки, мазки из зева, образцы при коклюше.
• Производство: чистые изоляты для изготовления вакцин.
• Хранение: поддержание стоковых культур Bordetella pertussis на скосах с еженедельным пересевом.

Состав

Состав, г/л:

# Эквивалент мясного экстракта.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 54,5 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения при постоянном перемешивании для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении ≈0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. На каждые 100 мл среды добавьте:
   • 10 мл стерильной дефибринированной крови лошади;
   • 0,3 мл стерильного раствора пенициллина (100 Ед/мл);
   • 0,3 мл 0,1 % раствора 4:4 диамидо-дифениламин гидрохлорида.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: серый или серо-черный гомогенный свободнотекучий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность: черный непрозрачный гель с нерастворенными черными частицами в чашках Петри.
• Реакция: pH 7,5 ± 0,2 (5,45 % водный раствор при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением стерильной дефибринированной крови, раствора пенициллина (100 Ед/мл) и 0,1 % раствора 4:4 диамидо-дифениламин гидрохлорида после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Важное примечание: при разливке среды осторожно встряхните колбу для получения однородной суспензии угля, так как он имеет тенденцию оседать на дно.

Ограничения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве.