HiMedia M642-100G Основа лизиновой среды

Порошкообразная питательная среда HiMedia M642-100G «Основа лизиновой среды» производства HiMedia с химически определённым составом и конечным pH 5,0 ± 0,2. Среда предназначена для выделения и количественного определения диких дрожжей в посевных пивоваренных дрожжах при инкубации образцов при 25 °C.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и количественного определения диких дрожжей в посевных дрожжах, используемых в пивоваренной промышленности.

Состав

Состав среды на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Технические характеристики

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 6,62 г порошка в 100 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 1 мл 50%-ного лактата калия (FD123).
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Отрегулируйте pH до 5,0 с помощью 10%-ной молочной кислоты.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Моррис и Эдди описали эту сложную среду для выделения и количественного определения диких дрожжей в посевных дрожжах, применяемых в пивоваренной промышленности. Уолтерс и Тиселтон использовали жидкую синтетическую среду, в которой лизин являлся единственным источником азота, и установили, что многие типы дрожжей способны утилизировать лизин. Позднее Моррис и Эдди разработали твёрдую лизиновую среду.

Большинство штаммов Saccharomyces, используемых в пивоваренной и другой ферментативной промышленности, не утилизируют лизин, тогда как дикие штаммы способны его использовать. Лизиновая среда использует это различие в метаболизме для разделения двух типов дрожжей. Среда содержит витамины и микроэлементы, необходимые для поддержания метаболической активности дрожжей. Лизин служит единственным источником азота и утилизируется многими типами дрожжей.

Для посева рекомендуется использовать отмытые аликвоты дрожжевой массы, наносимые на поверхность среды. Оптимальной считается суспензия объёмом 0,2 мл с концентрацией 10⁷ клеток/мл. Образец инкубируют при 25 °C и ежедневно осматривают, подсчитывая все выросшие колонии, то есть лизин-положительные колонии.

Степень контаминации выражают как число клеток диких дрожжей на 1 млн клеток исходного инокулята. Число клеток в инокуляте имеет значение: небольшое количество пивоваренных дрожжей — около 100–1000 клеток — даёт ограниченный рост, тогда как 10 000 клеток пивоваренных дрожжей обеспечивают прямое измерение количества диких дрожжей-контаминантов.

Исследуемый материал

Тип образца: пивоваренная проба.

Сбор и обращение с образцами

Для пивоваренных образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25–30 °C в течение до 7 суток.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от почти белого до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,78%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный гель от почти белого до бледно-жёлтого цвета, от прозрачного до слегка опалесцирующего.
• Реакция: реакция 6,6%-ного водного раствора при 25 °C; pH 5,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 4,80–5,20.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения комкования из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо герметично закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Индивидуальные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать вариабельные характеры роста на этой среде.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

Утилизацию инфекционных материалов необходимо выполнять в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы согласно действующим лабораторным методикам.