HiMedia M639I-500G Основа агара с окситетрациклином, глюкозой и дрожжевым экстрактом (OGYE)

Питательная среда HiMedia M639I-500G Основа агара с окситетрациклином, глюкозой и дрожжевым экстрактом (OGYE) — порошковая основа с конечным pH 6,6 ± 0,2. Предназначена для выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов в молоке и молочных продуктах с последующим добавлением селективной добавки после автоклавирования.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов из молока и молочных продуктов.

Состав и критерии эффективности соответствуют ISO 1992 и ISO/DIS 6611:2004.

Тип образца: молочные продукты.

Состав

Спецификация среды OGYE по ISO 1992 и ISO/DIS 6611:2004

Состав основы M639I

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Селективные добавки

Селективную добавку вносят после автоклавирования.

OxyT Selective Supplement FD032

Количество: 1 флакон.

После восстановления содержимое одного флакона OxyT Selective Supplement FD032 или Genox Selective Supplement FD131 асептически добавляют в охлаждённую питательную среду.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 18,5 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; указанное производителем давление 15 фунтов на квадратный дюйм соответствует примерно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте восстановленное содержимое одного флакона OxyT Selective Supplement FD032 или Genox Selective Supplement FD131.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Кислые среды не являются полностью подходящими для подсчёта дрожжей и плесневых грибов в пищевых продуктах, поскольку подвергшиеся тепловому стрессу клетки дрожжей не переносят кислые условия, необходимые для подавления бактериального загрязнения. Рост дрожжей и плесневых грибов часто ограничивается присутствием кислотоустойчивой бактериальной флоры.

Для различных видов пищевых продуктов, условий инкубации и исследуемых микроорганизмов необходимы более активные среды и различные селективные агенты. При определённых условиях и при исследовании таких продуктов, как молоко и молочные продукты, одного окситетрациклина недостаточно для получения надёжных результатов подсчёта дрожжей и плесневых грибов.

Mossel и соавторы (1) установили, что при исследовании белковых пищевых продуктов, сильно загрязнённых грамотрицательными палочками, для полного подавления контаминирующей микрофлоры необходимо использовать одновременно окситетрациклин и гентамицин FD131.

Среды OGYE были разработаны Mossel и соавторами для селективного выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов в пищевых продуктах (1, 2). Было установлено, что добавление селективной добавки с окситетрациклином в среду с нейтральным pH повышает восстановление и количество выделяемых дрожжей и плесневых грибов по сравнению с подкисленной средой.

Психротрофные дрожжи также могут быть выделены при включении в среду гентамицина (3). Комитет ISO (4) рекомендовал среды OGYE с pH 6,6 ± 0,2 для выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов из молока и молочных продуктов.

Функции компонентов:

• дрожжевой экстракт обеспечивает необходимые питательные вещества для роста;
• декстроза служит источником углерода и энергии;
• низкий pH способствует снижению количества бактериальной флоры;
• окситетрациклин повышает селективность среды за счёт подавления роста лактобацилл, встречающихся в молоке и молочных продуктах при низком pH.

Выбор подходящей среды для количественного определения дрожжей и плесневых грибов в значительной степени зависит от природы исследуемого пищевого продукта и микроорганизмов, способных на нём расти.

При внесении не более 1 мл разведения пищевого продукта 10⁻¹ и инкубации при 22 °C среды сохраняют бактериостатические свойства. Количество дрожжей или плесневых грибов рассчитывают на 1 г или 1 мл исследуемого образца: число колоний умножают на коэффициент разведения.

Молочнокислые бактерии подавляются на этой среде.

Подготовка и обращение с образцами

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы отличаются потребностями в условиях роста и могут демонстрировать различные варианты роста на этой среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом индивидуальных требований.

Условия эффективности

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текущий порошок от кремового до светло-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 3,7 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдают после инкубации при 25–30 °C в течение 2–5 суток с добавлением одного флакона OxyT Selective Supplement FD032 или Genox Selective Supplement FD131.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM;
• # — ранее организм был известен как *Asper