HiMedia M636S-500G Основа агара с феноловым красным, яичным желтком и полимиксином
Питательная среда HiMedia M636S-500G Основа агара с феноловым красным, яичным желтком и полимиксином — порошковая основа для приготовления агара Маннитол–яичный желток–полимиксин (MYP), фасовка 500 г. Основа предназначена для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах, при этом перед использованием требует добавления стерильных растворов сульфата полимиксина B и эмульсии яичного желтка.
Описание
Питательная среда HiMedia M636S-500G Основа агара с феноловым красным, яичным желтком и полимиксином — порошковая основа для приготовления агара Маннитол–яичный желток–полимиксин (MYP), фасовка 500 г. Основа предназначена для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах, при этом перед использованием требует добавления стерильных растворов сульфата полимиксина B и эмульсии яичного желтка.
Назначение и область применения
Агар MYP применяют для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах. Среда разработана Mossel и рекомендована APHA; основа MYP также рекомендована BIS для выделения и количественного определения Bacillus cereus.
При большом количестве Bacillus cereus в некоторых пищевых продуктах могут образовываться метаболиты, вызывающие клинические симптомы пищевого отравления.
Состав
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Пептический перевар животной ткани | 10,000 |
| Мясной экстракт | 1,000 |
| D-маннитол | 10,000 |
| Хлорид натрия | 10,000 |
| Феноловый красный | 0,025 |
| Агар | 15,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 7,2 ± 0,1 |
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 46,03 г порошка в 900 мл дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте автоклавированием при давлении около 0,103 МПа (15 фунтов на кв. дюйм) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите среду до 55 °C.
- В асептических условиях добавьте стерильный раствор сульфата полимиксина B (FD003) до конечной концентрации 100 Ед/мл.
- Добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) на 1000 мл среды.
- Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Пептический перевар животной ткани и мясной экстракт обеспечивают среду источниками азота.
Ферментацию маннитола выявляют с помощью фенолового красного: колонии, ферментирующие маннитол, окрашивают среду в жёлтый цвет.
Добавленная эмульсия яичного желтка позволяет дифференцировать колонии, продуцирующие лецитиназу. Такие колонии окружены зоной белого преципитата.
Сульфат полимиксина B ограничивает рост грамотрицательных бактерий, включая Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.
Дифференциальные свойства среды позволяют отличать Bacillus cereus от других видов рода Bacillus по неспособности Bacillus cereus ферментировать маннитол и слабому спорообразованию. Кислота, образуемая микроорганизмами, отличными от Bacillus cereus, часто диффундирует в среду, что затрудняет различение ферментирующих и неферментирующих маннитол микроорганизмов. Для подтверждения истинной реакции рекомендуется перенести подозрительные колонии на свежую среду.
Колонии с агара MYP пересеивают на питательный агар и инкубируют при 30 °C в течение 24 ч для наблюдения или определения вегетативных клеток, спорангиев, морфологии спор и липидных глобул внутри вегетативных клеток.
Контроль качества
Внешний вид
Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
- Базальная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
- После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется непрозрачный гель светло-оранжевого цвета.
Реакция
Реакция водного раствора с концентрацией 4,6 % масс./об. при 25 °C.
- pH: 7,2 ± 0,1.
Культуральные характеристики
Диапазон pH: 7,10–7,30.
Культуральные характеристики определяют после добавления эмульсии яичного желтка FD045 и сульфата полимиксина B FD003, после инкубации при 32 °C в течение 18–40 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии | Лецитиназная активность |
|---|---|---|---|---|---|
| Bacillus cereus ATCC 10876 | 50–100 | обильный | ≥50 % | красный | положительная реакция, непрозрачная зона вокруг колонии |
| Bacillus subtilis ATCC 6633 | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | отрицательная реакция |
| Escherichia coli ATCC 25922 | 50–100 | отсутствует — слабый | ≤10 % | ||
| Proteus mirabilis ATCC 25933 | 50–100 | обильный | ≥50 % | красный | отрицательная реакция |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | 50–100 | отсутствует — слабый | ≤10 % | ||
| Staphylococcus aureus ATCC 25923 | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | положительная реакция, непрозрачная зона вокруг колонии |
Технические характеристики
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Происхождение | Животное |
| Тип продукта | Стандартный |
| Физическая форма | Порошок |
| Тип упаковки | Полиэтилен высокой плотности (HDPE) |
- Назначение изделия: основа.
- Масса: 500 г.
- Температура хранения порошка: ниже 30 °C.
- Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
- Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
- Температурный диапазон из карточки товара: 10–30 °C.
Дополнительные компоненты
Для приготовления готовой среды необходимы:
- стерильный раствор сульфата полимиксина B FD003;
- стерильная эмульсия яичного желтка FD045;
- дистиллированная вода;
- стерильные чашки Петри.
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 500г |
|---|
