HiMedia M636S-100G Основа агара с феноловым красным, яичным желтком и полимиксином

Основа агара с феноловым красным, яичным желтком и полимиксином HiMedia M636S-100G (Mannitol Yolk Polymyxin Agar Base) предназначена для выделения и количественного учёта Bacillus cereus. Среда используется для анализа пищевых продуктов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Mannitol Yolk Polymyxin (MYP) разработана по методике Mossel et al. и рекомендована APHA и BIS для идентификации Bacillus cereus. При наличии в больших количествах в определенных пищевых продуктах Bacillus cereus может вырабатывать метаболиты, вызывающие симптомы пищевого отравления.

Принцип работы среды основан на следующих механизмах:

• Источники питания: пептический перевариватель тканей животных и мясной экстракт обеспечивают азот.
• Ферментация маннитола: индикатор феноловый красный позволяет обнаружить ферментацию маннитола, при которой колонии приобретают жёлтый цвет.
• Лецитиназная активность: добавление эмульсии яичного желтка позволяет дифференцировать колонии, вырабатывающие лецитиназу, которые окружаются зоной белого осадка.
• Селективность: сульфат полимиксина B подавляет рост грамотрицательных бактерий, таких как Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

Данная среда позволяет отличить Bacillus cereus от других видов Bacillus по его способности не ферментировать маннитол и слабой споруляции. Поскольку кислоты, вырабатываемые другими организмами, могут диффундировать по среде, затрудняя различие между ферментирующими и неферментирующими маннитол штаммами, рекомендуется переносить подозрительные колонии на свежую среду для подтверждения реакции.

Для определения морфологии вегетативных клеток, спорангиев, спор и липидных глобул внутри вегетативной клетки колонии с агара MYP пересевают на питательный агар и инкубируют при 30 °C в течение 24 часов.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 46,03 г основы в 900 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 55 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильный раствор сульфата полимиксина B (FD003) до конечной концентрации 100 ед/мл и 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) на 1000 мл среды.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • Базовая среда: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления эмульсии яичного желтка (FD045): светло-оранжевый непрозрачный гель.
• Реакция: pH 4,6 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C составляет 7,2 ± 0,1.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают с добавлением эмульсии яичного желтка (FD045) и сульфата полимиксина B (FD003) после инкубации при 32 °C в течение 18–40 часов. Диапазон pH: 7,10–7,30.

Технические характеристики

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.