HiMedia M636F-500G Основа MYP агара

Основа питательной среды HiMedia M636F-500G Основа MYP агара представляет собой порошковую среду массой 500 г. Основа MYP-агара предназначена для выделения, идентификации и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах с последующим хранением готовой среды при 2–8 °C.

Назначение и принцип дифференциации

Основа MYP-агара применяется для выделения и идентификации Bacillus cereus в соответствии с методикой FDA BAM. Дифференциация Bacillus cereus от других бактерий основана на активности лецитиназы, ферментации маннита и устойчивости к полимиксину B.

Bacillus cereus встречается в почве, на овощах, в сырых и переработанных пищевых продуктах, мясе, зерновых культурах, пастеризованном свежем и сухом молоке. При благоприятных условиях микроорганизм размножается и может вызывать желудочно-кишечные заболевания. Bacillus cereus связан с двумя формами пищевого отравления:

• рвотной формой, обусловленной высокостабильным токсином, сохраняющим активность при высокой температуре, воздействии трипсина и пепсина, а также при экстремальных значениях pH;
• диарейной формой, обусловленной термолабильным и чувствительным к кислотам энтеротоксином.

Активность лецитиназы является ключевой реакцией при дифференциальной идентификации Bacillus cereus, часто встречающегося и значимого вида в клинических лабораториях, от большинства других видов рода Bacillus. При наличии у неизвестного изолята активности лецитиназы предварительную идентификацию Bacillus cereus проводят также по морфологии колоний, гемолитической реакции и результатам тестов на подвижность.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды.

HM Peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,01 г порошка в 450 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунт-силы на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое 1 флакона стерильного раствора сульфата полимиксина B FD003 до конечной концентрации 100 ЕД/мл.
6. Добавьте 25 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045F.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Функции компонентов

• Пептон и HM Peptone B обеспечивают источники азота и углерода, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества.
• Маннит служит источником углерода; его ферментация приводит к образованию жёлтой окраски колоний.
• Эмульсия яичного желтка обеспечивает дифференциацию колоний, продуцирующих лецитиназу; такие колонии окружены зоной белого осадка.
• Сульфат полимиксина B подавляет рост грамотрицательных бактерий.
• Совокупность указанных свойств позволяет дифференцировать Bacillus cereus от других видов рода Bacillus.

Контроль качества

Внешний вид и гелеобразование

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется непрозрачный гель светло-оранжевого цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,6 % при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления эмульсии яичного желтка FD045 и сульфата полимиксина B FD003, после инкубации при 32 °C в течение 18–40 ч.

Технические характеристики

• Наименование: основа MYP-агара.
• Артикул: M636F.
• Производитель: HiMedia.
• Назначение: основа питательной среды.
• Физическая форма: порошок.
• Масса: 500 г.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности).
• Температурный диапазон: 10–30 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Рекомендуемая температура хранения готовой среды: 2–8 °C.

Хранение и срок годности

Храните порошок при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Совместимые реагенты

• FD003 — стерильный раствор сульфата полимиксина B; добавляется после охлаждения базовой среды до 45–50 °C до конечной концентрации 100 ЕД/мл.
• FD045F — стерильная эмульсия яичного желтка; добавляется в объёме 25 мл.