Основа агара MYP HiMedia M636-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды Основа агара MYP HiMedia M636-500G (уп/500 гр) производства HiMedia — диагностическая агаровая основа с конечным pH 7,1±0,2. Основа агара MYP предназначена для выделения и идентификации патогенных видов стафилококков и Bacillus с добавлением селективной добавки FD003 и эмульсии яичного желтка FD045.

Назначение

Основа агара MYP рекомендована для выделения и идентификации патогенных стафилококков и видов Bacillus, включая Bacillus cereus.

Тип питательной среды: диагностический
Назначение изделия: основа
Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03709
Форма выпуска: порошок
Происхождение: животное
Тип продукта: стандартный
Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Состав

Состав, г/л:

¹ Эквивалент мясного экстракта.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Bacillus cereus широко распространён в почве, растительности, воде и пыли. Микроорганизм выделяют из различных пищевых продуктов, включая овощи, мясо, зерновые культуры, пастеризованное свежее молоко и сухое молоко, а также продукты промышленной переработки.

При благоприятных условиях Bacillus cereus размножается и вызывает желудочно-кишечные заболевания. Микроорганизм связан с двумя формами пищевого отравления: рвотной и диарейной. Рвотная форма обусловлена высокостабильным токсином, сохраняющим активность после воздействия высокой температуры, трипсина, пепсина и экстремальных значений pH. Диарейная форма обусловлена термолабильным и кислотолабильным энтеротоксином.

Ключевой реакцией дифференциальной идентификации Bacillus cereus, наиболее часто встречающегося и значимого вида в клинических лабораториях, от большинства других видов Bacillus является лецитиназная активность. Если неизвестный изолят продуцирует лецитиназу, предварительную идентификацию как Bacillus cereus проводят также по морфологии колоний, гемолитической реакции и результатам тестов на подвижность.

Агар Маннитол–яичный желток–полимиксин (MYP), разработанный Mossel и соавторами, применяется для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах. При наличии в значительном количестве в некоторых пищевых продуктах Bacillus cereus может образовывать метаболиты, вызывающие клинические симптомы пищевого отравления.

Среда MYP дифференцирует Bacillus cereus от других бактерий по следующим признакам:

• активности лецитиназы;
• ферментации маннита;
• устойчивости к полимиксину, содержащемуся в селективной добавке FD003;
• способности или неспособности к спорообразованию;
• морфологии колоний.

Пептон и экстракт HM являются источниками азота. Ферментацию маннита выявляют с помощью фенолового красного: образование кислоты при ферментации вызывает появление жёлтой окраски колоний, ферментирующих маннит. Добавленная эмульсия яичного желтка позволяет дифференцировать лецитиназа-продуцирующие колонии: вокруг таких колоний образуется зона белого осадка.

Селективная добавка PolyB FD003 ограничивает рост грамотрицательных бактерий, таких как Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa. Среда позволяет отличать Bacillus cereus от других видов Bacillus по неспособности ферментировать маннит и слабому спорообразованию. Bacillus cereus расщепляет компоненты яичного желтка и формирует типичные колонии бациллярной формы.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 23,01 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; указанное производителем давление — 15 фунтов на квадратный дюйм (примерно 0,103 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона стерильного раствора селективной добавки PolyB FD003 до конечной концентрации 100 ед./мл.
6. Добавьте 50 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обращение с образцами

• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим рекомендациям.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим рекомендациям и местным стандартам.
• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым методическим рекомендациям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым методическим рекомендациям.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковый характер роста на среде.
2. Если неизвестный изолят продуцирует лецитиназу, предварительную идентификацию Bacillus cereus необходимо проводить также с учётом морфологии колоний, гемолитической реакции и результатов тестов на подвижность.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базальная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется непрозрачный гель светло-оранжевого цвета.

Реакция среды

Реакция 4,6%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,1±0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики определяют после инкубации при 32 °C в течение 18–40 ч с добавлением эмульсии яичного желтка FD045 и селективной добавки PolyB FD003.