HiMedia M636-100G Основа MYP агара (феноловый красный, яичный желток, полимиксин)

Порошкообразная питательная среда HiMedia M636-100G Основа MYP агара (феноловый красный, яичный желток, полимиксин) с фасовкой 100 г. Применяется для выделения и идентификации патогенных стафилококков и видов Bacillus, при этом готовая среда требует добавления эмульсии яичного желтка и селективной добавки PolyB.

Назначение

Основа MYP-агара предназначена для выделения и идентификации патогенных стафилококков и видов Bacillus. Типы исследуемых образцов:

• клинические образцы — фекалии;
• пищевые образцы;
• образцы воды.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту.

Принцип дифференциации и интерпретация

Bacillus cereus широко распространён в почве, растительности, воде и пыли. Микроорганизм выделяли из различных пищевых продуктов, включая овощи, мясо, зерновые культуры, пастеризованное свежее и сухое молоко, а также продукты промышленной переработки.

При благоприятных условиях Bacillus cereus размножается и вызывает желудочно-кишечные заболевания. Микроорганизм связывают с двумя формами пищевого отравления:

• рвотной формой;
• диарейной формой.

Рвотная форма обусловлена высокостабильным токсином, сохраняющим активность после воздействия высокой температуры, трипсина, пепсина и экстремальных значений pH. Диарейная форма обусловлена термолабильным и кислотолабильным энтеротоксином.

Ключевой реакцией дифференциальной идентификации Bacillus cereus от большинства других видов Bacillus является лецитиназная активность. При наличии лецитиназной активности в неизвестном изоляте предварительную идентификацию Bacillus cereus проводят также по морфологии колоний, гемолитической активности и результатам тестов на подвижность.

Mossel и соавторы разработали MYP-агар — маннитол-яичный желточно-полимиксиновый агар, предназначенный для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах. Методика рекомендована APHA. При наличии в некоторых пищевых продуктах в больших количествах Bacillus cereus может вырабатывать метаболиты, вызывающие клинические симптомы пищевого отравления.

Среда MYP дифференцирует Bacillus cereus от других бактерий по следующим признакам:

• лецитиназная активность;
• ферментация маннитола;
• устойчивость к полимиксину, поступающему с селективной добавкой FD003.

Пептон и экстракт HM в составе MYP-агара служат источниками азота. Ферментацию маннитола выявляют с помощью фенолового красного: при образовании кислоты колонии, ферментирующие маннитол, окрашиваются в жёлтый цвет.

Добавленная эмульсия яичного желтка способствует дифференциации лецитиназопродуцирующих колоний: вокруг таких колоний образуется зона белого осадка. Селективная добавка PolyB FD003 ограничивает рост грамотрицательных бактерий, включая Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

Дифференциальные свойства среды позволяют отличать Bacillus cereus от других видов Bacillus по неспособности ферментировать маннитол и слабому спорообразованию. Bacillus cereus расщепляет компоненты яичного желтка и образует типичные колонии в форме бацилл.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,01 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона стерильного раствора селективной добавки PolyB FD003 до конечной концентрации 100 ед./мл.
6. Добавьте 50 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обращение с образцами

Пищевые образцы

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Образцы воды

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативам.

Клинические образцы

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различную интенсивность и характер роста на среде.
2. При наличии лецитиназной активности в неизвестном изоляте предварительную идентификацию Bacillus cereus необходимо проводить также по морфологии колоний, гемолитической активности и результатам тестов на подвижность.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется непрозрачный гель светло-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,6 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 32 °C в течение 18–40 ч с добавлением эмульсии яичного желтка FD045 и селективной добавки PolyB FD003.

* Соответствующие номера WDCM.

** Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Хранение и срок годности

• Температура хранения нераскрытого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M636-100G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандарт