Селективный агар для выделения C.perfringens HiMedia M634-100G (уп/100 гр)

Селективная питательная среда Селективный агар для выделения C.perfringens HiMedia M634-100G (уп/100 гр) с конечным pH 7,2 ± 0,2. Среда предназначена для селективного выделения и количественного учёта Clostridium perfringens в пищевых продуктах и других образцах; культивирование проводят в анаэробных условиях при 46 °C в течение 18–48 ч.

Назначение и область применения

Триптозо-сульфит-неомициновый агар (TSN-агар) применяют для селективного выделения Clostridium perfringens из пищевых продуктов и других исследуемых образцов. Среда представляет собой модификацию среды Мосселя, разработанную для селективного выделения и количественного определения C. perfringens в пищевых продуктах.

Пищевые токсикоинфекции, вызываемые Clostridium perfringens, относятся к распространённым видам пищевых заболеваний человека. Обычно с ними связаны термически обработанное мясо или мясо птицы, содержащие большое количество жизнеспособных клеток. Основные симптомы диареи при отравлении C. perfringens вызывает термолабильный энтеротоксин, который продуцируется только спорулирующими клетками.

Состав

Состав среды на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Триптоза и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, витаминами группы B и другими питательными веществами, необходимыми для роста микроорганизмов.

Антибиотики — неомицин и сульфат полимиксина B — подавляют рост грамотрицательных кишечных бацилл. Неомицин также оказывает летальное действие на C. bifermentans.

Чёрная окраска колоний C. perfringens обусловлена образованием сульфида железа после восстановления сульфита. Повышенная температура инкубации 46 °C придаёт среде специфичность в отношении C. perfringens.

Предположительно чёрные колонии C. perfringens необходимо подтверждать биохимическими методами. Селективность среды приводит к подавлению роста некоторых штаммов C. perfringens.

При анаэробной инкубации рекомендуется добавлять тиогликолят.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 40,07 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в ёмкости с завинчивающимися крышками.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 118 °C в течение 12 мин с неплотно закрытыми крышками.
5. Закройте крышки, пока среда ещё горячая.
6. При необходимости добавьте 5 мл стерильного буферного тиогликолятного раствора на каждые 200 мл среды, если приготовленная среда будет инкубироваться в анаэробных условиях.

Буферный водный тиогликолятный раствор содержит:

• 35 мл буферной смеси, состоящей из 5,7 % дикалийфосфата и 28 % карбоната натрия;
• 15 мл раствора тиогликолята натрия концентрацией 13,3 %.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,0%-ного массо-объёмного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после инкубации при 46 °C в течение 18–48 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 2–8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Техническое отличие методики

В отличие от неспецифичных агаризованных сред, TSN-агар сочетает селективное подавление грамотрицательной кишечной микрофлоры антибиотиками, выявление C. perfringens по чёрным колониям вследствие восстановления сульфита и инкубацию при 46 °C; предположительные результаты требуют биохимического подтверждения.