Дифференциальная питательная среда Основа маннит-солевого агара для детекции липазы HiMedia M627-500G (уп/500 гр) производства HiMedia содержит 75,000 г/л хлорида натрия. Применяется для селективного выделения и идентификации патогенных стафилококков по липазной активности и ферментации маннита; высокая концентрация хлорида натрия может вызывать образование комков при контакте порошка с воздухом.

Назначение

Основа маннит-солевого агара HiMedia M627-500G предназначена для селективного выделения и идентификации патогенных Staphylococcus aureus по признакам продукции липазы и ферментации маннита из клинических и неклинических образцов.

Тип питательной среды: диагностическая, дифференциальная.
Назначение изделия: основа питательной среды.
Сертификат: ФСЗ 2009/03705.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Эквивалент мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация результатов

Коагулазоположительный вид Staphylococcus, то есть Staphylococcus aureus, является документированным условно-патогенным микроорганизмом человека (1). S. aureus также выделяется из рекреационной воды, включая воду плавательных бассейнов, и поэтому рассматривается как индикатор риска для здоровья (2–5). S. aureus относительно устойчив к воздействию таких дезинфицирующих веществ, как хлор и хлорид натрия.

Маннит-солевой агар с липовителлином, рекомендованный APHA (6), используют для селективного выделения и идентификации патогенных S. aureus по продукции липазы и ферментации маннита.

Пептон HM B и специальный пептон служат источниками азотистых и углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ для роста бактерий. Повышенная концентрация хлорида натрия придаёт среде селективность в отношении Staphylococcus, подавляя сопутствующую микрофлору. D-маннит является ферментируемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты, выявляемой индикаторным красителем феноловым красным.

Липовителлин представляет собой липофосфопротеин, соединённый с лецитином в яичном желтке. Липовителлин также известен как вителлин или ововителлин и подавляет рост большинства бактерий, за исключением Staphylococcus. Эмульсия яичного желтка служит источником липидов для выявления липазной активности.

Методика проведения анализа

1. Инокулируйте пробирки с бульоном M1120 для стафилококков.
2. Инкубируйте пробирки при 35–37 °C в течение 24 ч.
3. Из пробирки с положительным результатом, определяемым по помутнению культуры, петлёй перенесите культуру на чашки с маннит-солевым агаром с липовителлином.
4. Инкубируйте чашки при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
5. Непрозрачные жёлтые зоны вокруг колоний расценивайте как положительный результат: непрозрачная зона указывает на активность липовителлина и липазы, а жёлтая окраска — на ферментацию маннита (6).

Приготовление питательной среды

1. Суспендируйте 11,1 г сухой основы в 93 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 7 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045 для получения конечной концентрации 2 %.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: экссудаты кожи, образцы гноя и другие аналогичные материалы.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам (7, 8).

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам (9).

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам (6).

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности могут содержаться в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда является селективной и может подавлять рост отдельных видов стафилококков.
2. Из-за высокой концентрации хлорида натрия среда склонна к образованию комков при воздействии воздуха.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• После добавления 2 % эмульсии яичного желтка: непрозрачные образования розового цвета в чашках Петри.

Реакция

Реакция 11,1 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления эмульсии яичного желтка и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде