Питательная среда Основа модифицированного Тергитол-7 агара HiMedia M616I-500G (уп/500 гр) предназначена для селективного выделения и подсчёта колиформных бактерий в воде мембранным методом. Основа применяется для микробиологического анализа проб воды; для полной идентификации выделенных микроорганизмов требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Основа модифицированного Тергитол-7 агара предназначена для селективного выделения и количественного определения колиформных микроорганизмов в воде методом мембранной фильтрации.

Состав и эксплуатационные характеристики соответствуют ISO 9308-1:2000. Методика также приведена в соответствии с рекомендациями международного комитета ISO и ГОСТ Р 52426-2005.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Тип образца: пробы воды

Состав

Расчётное количество компонентов на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с эксплуатационными параметрами.

⊗ Эквивалент мясного экстракта.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 57,15 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 2,5 мл 1%-ного раствора трифенилтетразолия хлорида (TTC) FD057.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Тергитол-7 агар представляет собой селективную и дифференциальную среду для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в воде. Исходная формула Тергитол-7 агара была модифицирована Chapman добавлением трифенилтетразолия хлорида (TTC); впоследствии среда была рекомендована комитетом ISO.

Тергитол-7 выполняет функцию селективного агента: подавляет рост грамположительных микроорганизмов и уменьшает роение бактерий рода Proteus, обеспечивая более эффективное выделение колиформных бактерий.

Ферментацию лактозы определяют по изменению окраски бромтимолового синего, используемого как индикатор pH. Трифенилтетразолия хлорид обеспечивает более раннее распознавание и идентификацию Escherichia coli и Klebsiella aerogenes в воде и пищевых продуктах.

Пептон, экстракт HM и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ, включая витамины группы B. Бромтимоловый синий является индикатором pH.

Колиформные бактерии, за исключением Escherichia coli и Klebsiella aerogenes, быстро восстанавливают TTC до нерастворимого формазана, который окрашивает колонии в красный цвет. Ферментирующие лактозу микроорганизмы образуют зеленовато-жёлтые колонии с жёлтыми зонами; неферментирующие лактозу микроорганизмы образуют красные колонии, окружённые синими зонами.

Мембранная фильтрация и инкубация

1. Пропустите исследуемую пробу через две мембраны.
2. Поместите одну мембрану на первую чашку Петри с Тергитол-7 агаром с добавлением TTC.
3. Инкубируйте первую чашку при 37 °C в течение 24 ч для определения общего количества колиформных бактерий.
4. Поместите вторую мембрану на вторую чашку Петри с Тергитол-7 агаром с добавлением TTC.
5. Инкубируйте вторую чашку при 44 °C в течение 18–24 ч для определения фекальных колиформных бактерий.
6. После инкубации при 44 °C жёлтые колонии с тёмно-жёлтым ореолом следует идентифицировать как фекальные колиформные бактерии.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,6%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.

Реакция

Реакция: водный раствор с концентрацией 5,71 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Продуктивность, специфичность и селективность оценивают с добавлением 1%-ного раствора TTC FD057 после инкубации при 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 ч.

Для оценки продуктивности показатель восстановления считают равным 100 % при росте бактерий на референсной среде — соево-казеиновой переваренной агаризованной среде (триптон-соевом агаре).

Продуктивность и специфичность

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее организм был известен как Enterobacter aerogenes.

^ Ранее организм был известен как Pseudomonas aeruginosa.

Селективность

Ограничения применения

Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.