HiMedia M616I-100G Модифицированная основа Tergitol-7 агара
Порошковая питательная среда HiMedia M616I-100G Модифицированная основа Tergitol-7 агара — основа для приготовления селективной дифференциальной среды, фасовка 100 г. Применяется для селективного выделения и количественного определения колиформных микроорганизмов в воде методом мембранной фильтрации; Tergitol-7 подавляет грамположительные микроорганизмы и снижает роение бактерий рода Proteus.
Описание
Порошковая питательная среда HiMedia M616I-100G Модифицированная основа Tergitol-7 агара — основа для приготовления селективной дифференциальной среды, фасовка 100 г. Применяется для селективного выделения и количественного определения колиформных микроорганизмов в воде методом мембранной фильтрации; Tergitol-7 подавляет грамположительные микроорганизмы и снижает роение бактерий рода Proteus.
Назначение
Модифицированная основа Tergitol-7 агара предназначена для приготовления среды, используемой при выделении и количественном определении колиформных микроорганизмов в образцах воды методом мембранной фильтрации. Состав и критерии эффективности соответствуют ISO 9308-1:2000.
Тип образца: образцы воды.
Состав
Расход основы: 57,15 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Пептон | 10,000 |
| Дрожжевой экстракт | 6,000 |
| Экстракт HM ⊗ | 5,000 |
| Лактоза | 20,000 |
| Tergitol 7 (гептадецилсульфат натрия) | 0,100 |
| Бромтимоловый синий | 0,050 |
| Агар | 16,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 7,2 ± 0,2 |
Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.
⊗ Эквивалент мясного экстракта.
Принцип действия и интерпретация результатов
Tergitol-7 агар представляет собой селективную и дифференциальную среду для обнаружения и количественного определения колиформных микроорганизмов в воде. Исходная формула Tergitol-7 агара была модифицирована Chapman путём добавления трифенилтетразолийхлорида (TTC); среда рекомендована комитетом ISO.
Tergitol-7 действует как селективный агент: подавляет грамположительные микроорганизмы и уменьшает роение видов Proteus, что облегчает восстановление колиформных микроорганизмов.
Ферментацию лактозы определяют по изменению окраски бромтимолового синего — индикатора pH. Трифенилтетразолийхлорид (TTC) обеспечивает более раннее распознавание и идентификацию Escherichia coli и Klebsiella aerogenes в воде и пищевых продуктах.
Пептон, экстракт HM и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ, включая витамины группы B. Бромтимоловый синий используется как индикатор pH. Колиформные микроорганизмы, за исключением Escherichia coli и Klebsiella aerogenes, быстро восстанавливают TTC до нерастворимого формазана, окрашивающего колонии в красный цвет.
Ферментирующие лактозу микроорганизмы образуют зеленовато-жёлтые колонии с жёлтыми зонами, а неферментирующие лактозу микроорганизмы — красные колонии, окружённые синими зонами.
Методика приготовления среды
- Приготовьте суспензию из 57,15 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте автоклавированием при давлении ≈0,103 МПа (15 фунтов давления) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- Добавьте 2,5 мл 1%-ного раствора трифенилтетразолийхлорида (TTC), реагент FD057.
- Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Методика анализа методом мембранной фильтрации
- Пропустите исследуемый образец через две мембраны.
- Поместите одну мембрану на одну чашку с TTC-Tergitol агаром, а вторую мембрану — на другую чашку с TTC-Tergitol агаром.
- Инкубируйте одну чашку при 37 °C в течение 24 ч для определения общих колиформных микроорганизмов.
- Инкубируйте вторую чашку при 44 °C в течение 18–24 ч для определения фекальных колиформных микроорганизмов.
- Жёлтые колонии с тёмно-жёлтым ореолом, образовавшиеся после инкубации при 44 °C, идентифицируйте как фекальные колиформные бактерии.
Пробоотбор и обращение с образцами
Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Ограничения применения
Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические тесты.
Контроль качества
Внешний вид
Однородный, сыпучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,6%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.
Реакция
Реакция 5,71%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.
pH
pH: 7,00–7,40.
Культуральная характеристика
Продуктивность: культуральную реакцию наблюдали после добавления 1%-ного раствора TTC, реагент FD057, и инкубации при 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 ч. Коэффициент восстановления считают равным 100 % для роста бактерий на референсной среде — соево-казеиновой агаровой среде (триптон-соевом агаре).
Специфичность: культуральную реакцию наблюдали после добавления 1%-ного раствора TTC, реагент FD057, и инкубации при 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 ч.
Селективность: культуральную реакцию наблюдали после добавления 1%-ного раствора TTC, реагент FD057, и инкубации при 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии на исходной среде | Цвет колонии с добавлением FD057 |
|---|---|---|---|---|---|
| Продуктивность | |||||
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | жёлтый с красным центром |
| Escherichia coli ATCC 8739 (00012*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | жёлтый с красным центром |
| Escherichia coli (00179*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | жёлтый с красным центром |
| # Klebsiella aerogenes ATCC 13048 (00175*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | красновато-коричневый |
| Citrobacter freundii ATCC 43864 (00006*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | жёлтый с красным центром |
| Специфичность | |||||
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) | 10³–10⁴ | рост | бесцветный с голубоватой зоной | красный с голубоватой зоной | |
| ^Pseudomonas paraeruginosa ATCC 9027 (00026*) | 10³–10⁴ | рост | бесцветный с голубоватой зоной | красный с голубоватой зоной |
Селективность
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост |
|---|---|---|
| Enterococcus faecalis ATCC 19433 (00009*) | ≥10⁴ | подавлен |
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) | ≥10⁴ | подавлен |
* Соответствующие номера WDCM.
Ранее название Enterobacter aerogenes.
^ Ранее название Pseudomonas aeruginosa.
Эффективность среды
Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при использовании среды в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.
Условия хранения
- Температура хранения сухой основы: 10–30 °C.
- Условия хранения сухой основы: плотно закрытая ёмкость.
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 100г |
|---|
