HiMedia M616I-100G Модифицированная основа Tergitol-7 агара

Модифицированная основа Tergitol-7 агара HiMedia M616I-100G предназначена для селективного выделения и подсчёта колиформных организмов в воде методом мембранной фильтрации. Состав и критерии эффективности среды соответствуют стандарту ISO 9308-1:2000; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Tergitol-7 агар является селективной дифференциальной средой для обнаружения и количественного определения колиформ в воде. В состав среды входит Tergitol-7 (натрия гептадецилсульфат), который подавляет рост грамположительных организмов и минимизирует «роение» видов Proteus, что обеспечивает более эффективное восстановление колиформ.

Дифференциация основана на следующих реакциях:

• Ферментация лактозы: фиксируется по изменению цвета индикатора бромтимолового синего.
• Восстановление TTC: трифенилтетразолийхлорид (TTC) быстро восстанавливается колиформами (за исключением Escherichia coli и Klebsiella aerogenes) до нерастворимого формазана, который окрашивает колонии в красный цвет.

Интерпретация результатов:

• Ферментирующие лактозу организмы: зеленовато-жёлтые колонии с жёлтыми зонами вокруг.
• Неферментирующие лактозу организмы: красные колонии, окружённые синими зонами.

Методика проведения анализа

1. Профильтруйте исследуемый образец через две мембраны.
2. Поместите мембраны на две чашки с TTC Tergitol агаром.
3. Инкубируйте одну чашку при 37 °C в течение 24 часов (для определения общего количества колиформ).
4. Инкубируйте вторую чашку при 44 °C в течение 18–24 часов (для определения фекальных колиформ).
5. Жёлтые колонии с глубоким жёлтым ореолом после инкубации при 44 °C идентифицируются как фекальные колиформные бактерии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,15 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 2,5 мл 1 % раствора трифенилтетразолийхлорида (TTC) (артикул FD057).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до светло-зелёного цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,6 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета
• Реакция 5,71 % водного раствора (при 25 °C): pH 7,2 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Контроль качества

Продуктивность и специфичность

Культуральный ответ наблюдался при добавлении 1 % раствора TTC (FD057) после инкубации при 36 $\pm$ 2 °C в течение 21 $\pm$ 3 часов. Степень восстановления считается 100 % при росте бактерий на референтной среде — соево-казеиновом-пептонном агаре (Tryptone Soya Agar).

Селективность

Область применения и ограничения

Среда используется для анализа проб воды. Для сбора и обработки образцов следует руководствоваться местными стандартами и установленными методиками.

Ограничения: для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, средства защиты глаз и лица) и соблюдать правила микробиологической безопасности.

Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.