Агар с Тергитолом-7 (основа) HiMedia M616-500G (уп/500 гр)

Питательная агаровая среда Агар с Тергитолом-7 (основа) HiMedia M616-500G (уп/500 гр) предназначена для селективного подсчёта и идентификации колиформных бактерий. Среда применяется при анализе проб воды и клинических образцов мочи, а для дифференциации колоний может использоваться с 1%-ным раствором трифенилтетразолия хлорида TTC (FD057).

Назначение

Рекомендуемое назначение: селективный подсчёт и идентификация колиформных микроорганизмов.

Области применения:

• анализ проб воды;
• исследование клинических образцов мочи;
• рутинный микробиологический анализ пищевых материалов;
• выявление общих и фекальных колиформных бактерий.

Тип питательной среды: диагностическая.

Назначение изделия: агар.

Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Состав

Состав среды приведён для 1 л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,13 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости в асептических условиях добавьте 3 мл 1%-ного раствора TTC (по 10 мл во флаконе) FD057.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип измерения и интерпретация

Агар с Тергитолом-7 первоначально разработан Chapman и позднее модифицирован добавлением 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (TTC). Среда является селективной и дифференциальной и используется для обнаружения и подсчёта колиформных микроорганизмов.

Селективное бактерицидное действие гептадецилсульфата натрия, также обозначаемого как Тергитол-7, подавляет грамположительные бактерии и роение бактерий рода Proteus, обеспечивая восстановление колиформных микроорганизмов. Пептон протеозный и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ, включая витамины группы B. Бромтимоловый синий используется как индикатор pH.

Интерпретация окраски колоний:

• лактозоферментирующие микроорганизмы образуют жёлтые колонии с жёлтыми зонами;
• Klebsiella и Enterobacter образуют зеленовато-жёлтые колонии;
• лактозонеферментирующие микроорганизмы образуют синие колонии;
• TTC восстанавливается бактериальной клеткой, за исключением Escherichia coli и Klebsiella aerogenes, с образованием формазана — красного окрашенного нерастворимого комплекса, поэтому колонии приобретают красную окраску.

Для анализа образец фильтруют через две мембраны. Каждую мембрану помещают на отдельную чашку с агаром Тергитол-7 и TTC. Одну чашку инкубируют при 37 °C в течение 24 ч для определения общих колиформных бактерий, вторую — при 44 °C в течение 18–24 ч для определения фекальных колиформных бактерий. Жёлтые колонии с тёмно-жёлтым ореолом после инкубации при 44 °C следует идентифицировать как фекальные колиформные бактерии.

Типы образцов

• Клинические образцы: моча.
• Образцы воды.

Сбор и обработка образцов

1. Отфильтруйте анализируемый образец через две мембраны.
2. Поместите одну мембрану на одну чашку с агаром Тергитол-7 и TTC, вторую мембрану — на другую чашку.
3. Инкубируйте одну чашку при 37 °C в течение 24 ч для определения общих колиформных бактерий.
4. Инкубируйте вторую чашку при 44 °C в течение 18–24 ч для определения фекальных колиформных бактерий.
5. Жёлтые колонии с тёмно-жёлтым ореолом после инкубации при 44 °C идентифицируйте как фекальные колиформные бактерии.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для дальнейшей идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.
• Реакция: реакция 3,31%-ного водного раствора при 25 °C; pH 6,9 ± 0,2.
• pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 1%-ного раствора TTC (FD057).

* Соответствующие номера WDCM.

# Ранее микроорганизм обозначался как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Комплект поставки и дополнительные компоненты

По заявке поставляется:

• FD057 — 1%-ный раствор трифенилтетразолия хлорида TTC, 5 флакончиков по 10 мл; используется для приготовления среды с добавлением 3 мл на 1000 мл приготовленной основы.