HiMedia M616-100G Основа Tergitol-7 агара

Основа Tergitol-7 агара HiMedia M616-100G — селективная дифференциальная питательная среда для количественного учёта и идентификации колиформных организмов. Применяется при анализе проб воды и клинических образцов (мочи); содержит гептадецилсульфат натрия (Tergitol-7) для подавления роста грамположительных бактерий и протезов.

Принцип измерения

Среда основана на методе Чепмена с последующей модификацией путём добавления 2,3,5-трифенилтетразолиумхлорида (TTC).

• Селективность: гептадецилсульфат натрия (Tergitol-7) ингибирует рост грамположительных бактерий и подавляет «роение» (swarming) рода Proteus, что обеспечивает более эффективное выделение колиформ.
• Дифференциация: бромтимоловый синий служит индикатором pH. Организмы, ферментирующие лактозу, образуют жёлтые колонии с жёлтыми зонами вокруг; Klebsiella и Enterobacter формируют greenish-yellow (зеленовато-жёлтые) колонии. Неферментирующие лактозу микроорганизмы образуют синие колонии.
• Роль TTC: 2,3,5-трифенилтетразолиумхлорид восстанавливается бактериальными клетками (за исключением Escherichia coli и Klebsiella aerogenes) с образованием формазана — красного нерастворимого комплекса, что приводит к окрашиванию колоний в красный цвет.
• Питательная основа: протеоз-пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают углеродом, азотом и витаминами группы B.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 33,13 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавить 3 мл 1 % раствора TTC (по 10 мл на флакон) |FD057|.
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

1. Профильтруйте исследуемый образец через две мембраны.
2. Поместите мембраны на две чашки с TTC-Tergitol агаром.
3. Инкубируйте одну чашку при 37 °C в течение 24 часов для определения общего числа колиформ.
4. Инкубируйте вторую чашку при 44 °C в течение 18–24 часов для определения фекальных колиформ.
5. Жёлтые колонии с глубоким жёлтым ореолом после инкубации при 44 °C идентифицируются как фекальные колиформные бактерии.

Технические характеристики

• Назначение: основа селективной среды
• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет порошка: от кремового до светло-зелёного, гомогенный, свободно текучий
• Цвет готовой среды: зелёный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• pH (при 25 °C): 6,9 $\pm$ 0,2 (диапазон 6,70–7,10)
• Желирование: плотный гель (сопоставим с 1,5 % агаром)
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное

Состав, г/л:

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 1 % раствора TTC (FD057).

* Соответствующие номера WDCM. *Примечание: Klebsiella aerogenes ранее была известна как Enterobacter aerogenes.

Область применения и ограничения

• Типы образцов: моча (клинические образцы), пробы воды.
• Ограничения: для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Меры предосторожности: только для профессионального использования In Vitro. При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Утилизация: использованные среды и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат деконтаминации путем автоклавирования или сжигания.