HiMedia M616-100G Основа Tergitol-7 агара

Питательная среда HiMedia M616-100G Основа Tergitol-7 агара — порошковая основа для селективного выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов. Применяется при анализе клинических образцов и воды с использованием раствора TTC и дифференциацией колоний по окраске.

Назначение

Основа Tergitol-7 агара предназначена для селективного выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов, включая общее количество колиформ и фекальные колиформы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,13 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавьте 3 мл 1%-ного раствора TTC (10 мл на флакон), код FD057.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Tergitol-7 агар первоначально разработан Chapman, позднее среда модифицирована добавлением 2,3,5-трифенилтетразолий хлорида (TTC). Среда обладает селективными и дифференциальными свойствами и используется для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов.

Гептадецилсульфат натрия (Tergitol-7) обладает селективным бактерицидным действием, подавляет рост грамположительных бактерий и роение Proteus, обеспечивая более эффективное восстановление колиформных микроорганизмов. Пептон протеозный и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ, включая витамины группы B. Бромтимоловый синий используется как индикатор pH.

Лактозоферментирующие микроорганизмы образуют жёлтые колонии с жёлтыми зонами вокруг них. Klebsiella и Enterobacter формируют зеленовато-жёлтые колонии. Лактозонеферментирующие микроорганизмы образуют синие колонии.

TTC восстанавливается бактериальной клеткой, за исключением Escherichia coli и Klebsiella aerogenes, с образованием формазана — красного окрашенного нерастворимого комплекса. В результате формируются колонии красного цвета.

Методика выявления колиформных микроорганизмов

1. Профильтруйте анализируемый образец через две мембраны.
2. Поместите каждую мембрану на отдельную чашку с TTC Tergitol агаром.
3. Одну чашку инкубируйте при 37 °C в течение 24 ч для определения общего количества колиформных микроорганизмов.
4. Вторую чашку инкубируйте при 44 °C в течение 18–24 ч для определения фекальных колиформных микроорганизмов.
5. После инкубации при 44 °C жёлтые колонии с тёмно-жёлтым ореолом идентифицируйте как фекальные колиформные бактерии.

Тип образцов

• Клинические образцы: моча.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Анализируемый образец фильтруют через две мембраны. Мембраны помещают на две чашки с TTC Tergitol агаром. Одну чашку инкубируют при 37 °C в течение 24 ч для определения общего количества колиформных микроорганизмов, вторую — при 44 °C в течение 18–24 ч для определения фекальных колиформных микроорганизмов.

Жёлтые колонии с тёмно-жёлтым ореолом после инкубации при 44 °C идентифицируют как фекальные колиформные бактерии.

Ограничения метода

Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.
• Реакция: реак