Агар для термостабильных ДНК HiMedia M613I-100G (уп/100 гр)

Агар для термостабильных ДНК HiMedia M613I-100G (уп/100 г) предназначен для обнаружения термостабильной дезоксирибонуклеазе (ДНКазе) активности при определении видов S. aureus в загрязнённых пищевых продуктах. Состав и критерии эффективности среды соответствуют международному стандарту ISO 8870:2006(E) 83:2006(E).

Принцип измерения

Среда содержит ДНК, которая при наличии ДНКазе-активности микроорганизмов деполимеризуется, что приводит к образованию прозрачной зоны вокруг роста колоний. Добавление толуидинового синего позволяет визуализировать эту активность благодаря метахроматическим свойствам красителя: в зоне деградации ДНК образуется отчетливая ярко-розовая реакция. Трис(гидроксиметил)аминометан служит буферной системой, а хлорид натрия и хлорид кальция обеспечивают ионный состав и поддерживают осмотический баланс.

Область применения

Среда рекомендуется для анализа молочных проб (молоко и молочные продукты). Применяется для дифференциации штаммов Staphylococcus aureus, многие из которых вырабатывают энтеротоксины, вызывающие пищевые отравления.

Методика проведения анализа

1. Подготовка культуры: 24-часовую культуру в бульоне BHI нагревают на водяной бане при температуре кипения в течение 15 минут для проверки термонуклеазной активности.
2. Подготовка среды: в агаровом слое вырезают лунки диаметром 6,5 мм.
3. Посев: в каждую лунку вносят по 10 мкл подготовленной культуры.
4. Инкубация: plates инкубируют при 35–37 °C в течение 4 ч (или при 50 °C в течение 2 ч). При отрицательных результатах время инкубации увеличивают до 24 ч.

Технические характеристики

Состав среды

Состав согласно ISO 8870:2006(E) 83:2006(E), г/л:

Состав M613I, г/л:

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободный порошок от светло-желтого до светло-серого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: синий прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• pH водного раствора (2,65 % масс/об при 25 °C): 8,80–9,20 (9,0 ± 0,2).

Культуральные характеристики

*соответствующие номера WDCM

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 26,56 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды, продолжая кипятить в течение 1–2 минут.
3. Стерилизация не требуется.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Ограничения и меры предосторожности

• Для анализа необходимо использовать чистые изоляты.
• Результаты должны быть подтверждены другими биохимическими тестами.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязненные материалы после использования подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Комплект поставки

• Агар для термостабильных ДНК (порошок), 100 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.