Агар для термостабильных ДНК HiMedia M613I-100G (уп/100 гр)

Сухая питательная среда Агар для термостабильных ДНК HiMedia M613I-100G (уп/100 гр) — агар для выявления термостабильной дезоксирибонуклеазы и дифференциации Staphylococcus aureus по активности термонуклеазы. Применяется при исследовании молока и молочных продуктов; для анализа используют чистую изолированную культуру, а результат подтверждают дополнительными биохимическими тестами.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для выявления активности термостабильной дезоксирибонуклеазы с целью установления видовой принадлежности Staphylococcus aureus в загрязнённых пищевых продуктах. Тип образцов:

• молоко;
• молочные продукты.

Состав и показатели эффективности среды основаны на методе ISO 8870:2006(E) / IDF 83:2006(E). Среда также рекомендована APHA для выявления активности термостабильной дезоксирибонуклеазы у S. aureus в загрязнённых пищевых продуктах.

Состав

Состав среды по ISO 8870:2006(E) / IDF 83:2006(E)

Концентрация компонентов указана в г/л.

Состав среды HiMedia M613I

Концентрация компонентов указана в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным показателям эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Рост Staphylococcus aureus в пищевых продуктах представляет потенциальную опасность для здоровья, поскольку многие штаммы S. aureus вырабатывают энтеротоксины, вызывающие пищевые отравления при употреблении заражённых продуктов. Вспышки стафилококковой интоксикации часто связаны с сыром, поэтому активность и распространённость стафилококков в молоке и сыре являются объектами микробиологических исследований.

ДНК, входящая в состав среды, позволяет выявлять активность ДНКазы: под действием фермента ДНК деполимеризуется, в результате чего вокруг зоны роста микроорганизмов формируется прозрачная зона. Толуидиновый синий облегчает обнаружение активности ДНКазы благодаря метахроматическим свойствам и образованию видимой яркой розово-красной реакции.

Трис(гидроксиметил)аминометан выполняет функцию буферной системы. Хлорид натрия и хлорид кальция обеспечивают наличие необходимых ионов и поддерживают осмотическое равновесие среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 26,56 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Продолжайте кипячение в течение 1–2 мин.
4. Стерилизация среды не требуется.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика определения термоядерной активности

Для анализа используют 24-часовую культуру в бульоне BHI. Культуру прогревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин для выявления активности термонуклеазы.

1. В агаровых чашках вырежьте лунки диаметром 6,5 мм.
2. Внесите в каждую лунку 10 мкл подготовленной культуры.
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4 ч.
4. Допустимый альтернативный режим инкубации: 50 °C в течение 2 ч.
5. Оцените реакцию по наличию окрашенных ореолов вокруг лунок.
6. При отрицательном результате продолжайте инкубацию до 24 ч и повторите оценку.

Культуральная реакция

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

• Форма: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-серого цвета.

Гелеобразование

• Гель: плотный, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Среда в чашках Петри: гель синего цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

• Условия определения: реакция водного раствора с концентрацией 2,65 % масс./об. при 25 °C.
• Значение pH: 9,0 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 8,80–9,20.

Технические характеристики

Требования к образцам и обращению

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Используйте только чистую изолированную культуру.
• Для подтверждения результата выполняйте дополнительные биохимические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытой ёмкости.
• Плотно закрывайте флакон после каждого использования.
• Защищайте продукт от влаги: гигроскопичность среды может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с продуктом, образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при обращении с образцами и культурами. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками обращения с инфекционными материалами.

Методические основы

Среда предназначена для применения в рамках методов исследования молочных продуктов и выявления термостабильной нуклеазы, продуцируемой коагулазоположительными стафилококками. Указанные в документации методические основы включают ISO 8870:2006(E) / IDF 83:2006(E) и методы APHA для микробиологического исследования пищевых и молочных продуктов.

По сравнению с составом среды, приведённым для ISO 8870:2006(E) / IDF 83:2006(E), в формуле HiMedia M613I изменено обозначение компонента «толуидиновый синий O» на «толуидиновый синий»; концентрации остальных компонентов и конечный pH совпадают с приведёнными значениями.

Сведения о производителе

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M613I-100G
• Полное наименование: Агар для термостабильных ДНК HiMedia M613I-100G (уп/100 гр)