Питательная среда Агар Ли для дифференцированного подсчета йогуртовых культур HiMedia M602-500G (уп/500 гр) — порошкообразный агар для раздельного определения Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus. Применяется для дифференциального подсчета йогуртовых заквасок и требует подготовки, стерилизации автоклавированием и инкубации в присутствии CO₂.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциального подсчета бактерий йогуртовых заквасок: Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus.

• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Триптон эквивалентен ферментативному гидролизату казеина.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 51,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию непосредственно до кипения.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 20 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Во время разлива тщательно перемешивайте среду, чтобы карбонат кальция равномерно оставался во взвешенном состоянии.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри, формируя гелевый слой толщиной 4–5 мм.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Принцип действия и интерпретация

Йогурт представляет собой ферментированный молочный продукт, в котором Streptococcus thermophilus и Lactobacillus bulgaricus являются основными микроорганизмами, активно взаимодействующими в симбиотических отношениях. Для получения оптимальной консистенции, вкуса и запаха йогурта оба вида должны присутствовать в закваске примерно в равных количествах. Преобладание одного из видов может вызывать дефекты продукта.

Агар Ли, описанный Lee и соавторами, используют для дифференциального подсчета бактерий йогуртовых заквасок. Та же среда рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для этой цели.

В состав агара Ли входит сахароза, которую большинство штаммов L. bulgaricus не ферментирует, тогда как S. thermophilus её ферментирует. Лактозу используют оба вида. Подобранное сочетание сахарозы и лактозы усиливает скорость образования кислоты у S. thermophilus и ограничивает кислотопродукцию L. bulgaricus.

Стрептококки растут первыми и образуют кремовый маслянистый запах за счёт диацетила и сходных метаболитов. В результате жизнедеятельности стрептококков окислительно-восстановительный потенциал среды снижается, что позволяет размножаться лактобациллам. Лактобациллы, в свою очередь, синтезируют продукты, стимулирующие рост стрептококков. Благодаря этому формируется характерный резкий ацетальдегидный аромат зрелого йогурта.

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают молочнокислые бактерии йогуртовой закваски необходимыми азотистыми питательными веществами. Лактоза и сахароза являются ферментируемыми углеводами. Карбонат кальция вместе с дикалий гидрофосфатом буферизует среду и предотвращает резкое снижение pH из-за образования молочной кислоты. Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH: в кислой среде он желтеет и придаёт колониям жёлтую окраску.

Перед использованием рекомендуется подсушивать чашки с готовой средой в течение 18–24 ч. Для стандартных процедур следует обращаться к соответствующим методикам.

Тип образца

• Чистая культура, выделенная из молочного образца
• Образец йогурта

Отбор и обращение с образцами

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с клиническими образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности следует уточнять в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Перед использованием рекомендуется подсушивать чашки с готовой средой в течение 18–24 ч.
2. Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Контроль качества

Эффективность среды ожидается при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-серого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,8%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется фиолетовый непрозрачный гель.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,15 % при 25 °C.
• pH по реакции: 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в присутствии углекислого газа (CO₂) после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Храните порошок в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в