Дифференциальная питательная среда «Дифференцирующий агар HYA для молочнокислых бактерий HiMedia M601» предназначена для различения Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus по морфологии колоний. Агар применяют для анализа чистых изолятов молочнокислых бактерий; подготовленную среду стерилизуют автоклавированием при 121 °C в течение 20 мин.

Назначение

Дифференцирующий агар HYA применяют для дифференциации Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus по культуральным свойствам, в первую очередь по морфологии колоний.

Тип образца: чистый изолят.

Йогурт представляет собой ферментируемый молочный продукт, в котором Streptococcus thermophilus и Lactobacillus bulgaricus являются основными микроорганизмами и находятся в активных симбиотических отношениях. Большое количество питательных сред, разработанных для молочнокислых бактерий, особенно для стрептококков и лактобацилл, связано с трудностями культивирования некоторых штаммов этих микроорганизмов. Выбор среды в определённой степени зависит от исследуемых штаммов, а также от продукта или среды их обитания.

В целом молочнокислые бактерии устойчивы к низкому pH, но могут быть чувствительны к другим неблагоприятным условиям. Образцы, предназначенные для определения количества жизнеспособных молочнокислых бактерий, не следует замораживать до проведения анализа.

На агаре HYA L. bulgaricus образует диффузные колонии с небольшой массой диаметром 2–10 мм, а S.thermophilus — отдельные колонии с большой массой диаметром 1–3 мм. Для получения оптимальных консистенции, вкуса и запаха многие исследователи считают необходимым присутствие двух видов в культуре примерно в равных количествах. Преобладание одного из видов может приводить к дефектам продукта. В связи с необходимостью поддержания баланса между кокками и палочками требуются методы определения относительной доли S.thermophilus и L.bulgaricus при совместном культивировании в молоке.

Дифференциация двух видов на агаре HYA основана на морфологии колоний. Пептон HM B и протеозопептон обеспечивают необходимые азотистые питательные вещества для роста обоих видов. Декстроза, галактоза и лактоза служат источниками энергии.

Состав

Содержание компонентов, г/л:

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,0 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 20 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип дифференциации

Различение Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus основано на различиях в морфологии колоний, формирующихся на агаре HYA. L. bulgaricus растёт в виде диффузных колоний с небольшой массой диаметром 2–10 мм, а S.thermophilus — в виде отдельных колоний с большой массой диаметром 1–3 мм.

Пептон HM B и протеозопептон являются источниками азотистых питательных веществ, необходимых для роста обоих видов. Декстроза, галактоза и лактоза обеспечивают микроорганизмы источниками энергии.

Тип образца и обращение с ним

Тип образца: чистый изолят.

Для отбора и обработки образцов следует применять соответствующие методы, установленные действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Для дальнейшей идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.
2. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать вариабельные характеры роста на этой среде.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Технические характеристики

• Назначение: дифференциация молочнокислых бактерий по морфологии колоний
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Форма продукта: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Масса для приготовления 1000 мл среды: 36,0 г
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• pH: 6,60–7,00
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Назначение изделия: агар

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,6 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде в плотно закрытом флаконе
• Дополнительные требования: хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Продукт обладает гигроскопичностью. При хранении во влажных или неподходящих условиях возможно образование комков. Для сохранения рабочих характеристик продукт следует использовать в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

Лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов должны соблюдаться в установленном порядке. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.