Основа бульона Джиолитти-Кантори HiMedia M584-500G (уп/500 гр)

Питательная среда — основа бульона Джиолитти-Кантори HiMedia M584-500G (уп/500 гр) производства HiMedia для селективного обогащения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов. Основа применяется для выявления стафилококков при низком содержании в пробе и используется с 3,5%-ным раствором теллурита калия FD047.

Назначение

Основа бульона Джиолитти-Кантори предназначена для приготовления жидкой селективной среды и селективного обогащения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов.

Среда применяется для восстановления и выявления небольшого количества стафилококков в пищевых материалах. Бульон Джиолитти–Кантори рекомендован для обнаружения Staphylococcus aureus в сухом молоке, детском питании и других пищевых продуктах. Среда также рекомендована Международной молочной федерацией и Американской ассоциацией общественного здравоохранения в качестве обогатительной среды для выявления S. aureus в сухом молоке и других пищевых продуктах, при этом микроорганизм должен отсутствовать в 1 г образца. Комитет ISO рекомендовал среду для исследования мяса и мясных продуктов.

Тип образца

Пищевые образцы.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. Пептон HM B# эквивалентен мясному экстракту.

• Концентрация при приготовлении: 54,2 г/л.
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.

Принцип действия и интерпретация результатов

Триптон, дрожжевой экстракт и пептон HM B служат источниками углерода, азота, витаминов, минералов и витаминов группы B. Маннитол и пируват натрия в базовой среде действуют как стимуляторы роста S. aureus.

Хлорид лития подавляет грамотрицательные лактозоферментирующие бациллы. Теллурит калия и глицин подавляют грамположительные бациллы. Добавление стерильного парафинового воска к инокулированной среде подавляет микрококки за счёт создания анаэробных условий.

Концентрацию теллурита калия необходимо снижать с учётом массы исследуемой пробы: 0,1–0,01 г.

Почернение среды, обычно в нижней части пробирки, в течение 48 ч указывает на присутствие S. aureus. При высеве почерневшей среды на агар Байрд–Паркера (M043) образуются чёрные колонии, окружённые прозрачными зонами.

Методика приготовления среды и проведения анализа

1. Суспендируйте 54,2 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте по 19 мл в пробирки размером 20 мм × 200 мм.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Быстро охладите среду до комнатной температуры.
6. Асептически добавьте в каждую пробирку по 0,3 мл селективной добавки PTe 3,5 % FD047 — стерильного раствора теллурита калия.
7. Для исследования мяса и мясных продуктов добавляйте 0,03 мл селективной добавки.
8. Перед использованием тщательно перемешайте среду.
9. Внесите 1 г образца или 1 мл подходящего разведения образца в 19 мл бульона Джиолитти–Кантори. Для каждого образца используйте две пробирки.
10. Покройте среду 5 мл расплавленного стерильного парафинового воска.
11. Инкубируйте при 37 °C в течение 24–48 ч и ежедневно проводите осмотр.
12. При почернении среды выполните пересев на агар Байрд–Паркера M043 для подтверждения: ожидаемый результат — чёрные колонии с прозрачными зонами вокруг.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки PTe 3,5 % FD047. Обозначения со звёздочкой соответствуют номерам WDCM.

Контроль качества

• Внешний вид: порошок от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого цвета, однородный, сыпучий, без комков.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор янтарного цвета, прозрачный, без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,42 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,70–7,10.
• Конечный pH: 6,9 ± 0,2 при 25 °C.

Рабочие характеристики среды ожидаются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке и использовании до истечения срока годности при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Пробоподготовка, сбор и обращение с образцами

Внесите 1 г образца или 1 мл подходящего разведения образца в 19 мл бульона Джиолитти–Кантори, используя две пробирки на образец. Покройте среду 5 мл расплавленного стерильного парафинового воска. Инкубируйте при 37 °C в течение 24–48 ч и осматривайте пробирки ежедневно.

Почернение среды, обычно в нижней части пробирки, в течение 48 ч указывает на наличие S. aureus. Почерневшую среду пересевают на агар Байрд–Паркера M043; наличие чёрных колоний с прозрачными зонами вокруг служит признаком, соответствующим обнаружению S. aureus.

При работе с образцами и культурами необходимо соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. Используйте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила безопасного обращения с образцами и культурами.
• Руководствуйтесь стандартными мерами предосторожности при работе с биологическими образцами.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности для получения указаний по безопасной работе с материалом.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухого продукта: от 10 до 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом: автоклавированием и/или сжиганием.

Инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с образцом, перед утилизацией необходимо обеззаразить. Утилизацию выполняют в соответствии с действующими лабораторными процедурами и методами обращения с биологически опасными материалами.

Технические характеристики

Комплект поставки и совместимые реагенты

По заявке поставляется:

• FD047 — раствор теллурита калия 3,5 %, селективная добавка PTe 3,5 %.

Для приготовления селективного бульона Джиолитти–Кантори добавляют 0,3 мл FD047 в каждую пробирку с подготовленной средой; при исследовании мяса и мясных