Основа агара K.R.A.N.E.P. (для стафилококков) HiMedia M583-100G (уп/100 гр)

Диагностическая питательная среда (основа) K.R.A.N.E.P. для стафилококков HiMedia M583-100G. Применяется для селективного подсчёта общего количества стафилококков в пищевых продуктах; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения

Среда K.R.A.N.E.P. (аббревиатура от основных компонентов: калий-роданид, актидион, азид натрия, яичный желток, пируват) предназначена для селективного выделения и подсчёта Staphylococcus aureus и коагулазоотрицательных стафилококков в пищевых продуктах.

Селективность обеспечивается присутствием тиоцианата калия и маннитола, а также азида натрия и циклогексимида. Пируват натрия стимулирует рост, а эмульсия яичного желтка служит диагностическим агентом.

• Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают необходимые питательные вещества, включая витамины группы B.
• Циклогексимид подавляет рост большинства дрожжей и плесневых грибов.
• Азид натрия ингибирует рост большинства аэробных организмов, в частности видов Bacillus, которые могут мешать культивированию стафилококков.
• Благодаря ингибиторам на данной среде не растут большинство грамотрицательных и многих грамположительных бактерий.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 71,99 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C и асептически добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Посев и интерпретация

Посев осуществляется методом посева на поверхность (0,1 мл инокулята) или методом капельного посева (по 0,05 мл из разных этапов десятичного разведения).

После инкубации в течение 48 часов колонии S. aureus характеризуются как золотисто-жёлтые с зоной осаждения яичного желтка (среда вокруг колонии остаётся опалесцирующей/непрозрачной). Важно: Для окончательной идентификации требуется проведение подтверждающих тестов на продукцию коагулазы. Колонии, типичные для S. aureus, но не давшие реакции с яичным желтком, также должны быть проверены на коагулазу.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Физическая форма: порошок
• Цвет порошка: от кремового до жёлтого, гомогенный свободно текущий
• Цвет и прозрачность готовой среды: базальная среда — светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления эмульсии яичного желтка — жёлтый непрозрачный гель
• Желирование: плотный гель (сопоставимо с 1,5 % агаром)
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: пищевые продукты.
• Ограничения: для полной идентификации коагулазоположительных штаммов обязательно проведение подтверждающих тестов.
• Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Требования: хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Комплект поставки и совместимость

• Основа агара K.R.A.N.E.P. (100 г)
• Дополнительно по заявке:
  • FD045 Эмульсия яичного желтка (100 мл)