Основа агара K.R.A.N.E.P. (для стафилококков) HiMedia M583-100G (уп/100 гр)

Сухая диагностическая питательная среда Основа агара K.R.A.N.E.P. (для стафилококков) HiMedia M583-100G (уп/100 гр) предназначена для селективного количественного определения стафилококков в пищевых продуктах. Основа используется для подсчёта общего количества стафилококков, при этом для полной идентификации коагулазоположительных штаммов требуются подтверждающие тесты на коагулазу.

Назначение

Рекомендуется для селективного количественного определения общего количества стафилококков в пищевых продуктах, включая коагулазоположительные и коагулазоотрицательные стафилококки.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 100 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. HM пептон B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 71,99 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Агар K.R.A.N.E.P. представляет собой селективную среду для количественного определения Staphylococcus aureus в пищевых продуктах. Среда впервые была описана Sinell и Baumgart.

Название K.R.A.N.E.P. образовано от первых букв основных диагностических, селективных и стимулирующих компонентов:

• Kalium — калий;
• Rhodanid — роданид, то есть тиоцианат;
• Actidione — актидион, то есть циклогексимид;
• Natriumazid — азид натрия;
• Eigelb — яичный желток;
• Pyruvate — пируват.

Селективность среды для выявления стафилококков обеспечивается наличием тиоцианата калия и маннитола. Азид натрия и циклогексимид дополнительно усиливают селективное действие среды. Пируват натрия и эмульсия яичного желтка выполняют функции стимулятора роста и диагностического агента соответственно.

Среда рекомендуется для селективного выделения коагулазоотрицательных стафилококков из мясных продуктов. Поэтому среда применяется для определения общего количества стафилококков в пищевых продуктах, включая коагулазоположительные и коагулазоотрицательные стафилококки.

Пептон, дрожжевой экстракт и HM пептон B обеспечивают среду необходимыми питательными веществами, включая витамины группы B. Циклогексимид подавляет рост большинства дрожжей и плесневых грибов. Азид натрия подавляет сопутствующие аэробные микроорганизмы, например виды Bacillus, которые могут мешать культивированию стафилококков. Из-за присутствия ингибирующих компонентов на среде не растут различные грамотрицательные и грамположительные бактерии.

Методика посева и интерпретация результатов

Посев выполняют одним из следующих способов:

• методом поверхностного посева с использованием 0,1 мл инокулята на чашку Петри;
• капельным методом с использованием по 0,05 мл из каждой десятикратной ступени разведения.

После инкубации в течение 48 ч хорошо выросшие золотисто-жёлтые колонии с зоной преципитации яичного желтка в среде, которая сохраняет непрозрачность, рассматривают как S. aureus.

Для подтверждения необходимы тесты на образование коагулазы. Колонии, типичные для S. aureus, но не имеющие реакции с яичным желтком, также следует исследовать на коагулазу. При положительном результате их принадлежность необходимо подтвердить дополнительными тестами.

Тип образца

Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов следует применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Реакция среды

Реакция 7,2%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления стерильной эмульсии яичного желтка FD045 и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

Для полной идентификации коагулазоположительных штаммов необходимы подтверждающие тесты на коагулазу.

Хранение и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за г