Основа среды для дифференциации лактобацилл и стрептококков HiMedia M582-500G (уп/500 гр)

Основа среды для дифференциации лактобацилл и стрептококков HiMedia M582-500G (уп/500 гр) — сухая дифференциальная агаровая среда с конечным pH 6,1 ± 0,2. Среда предназначена для получения обильного роста и дифференциации лактобактерий и стрептококков по морфологии колоний, восстановлению трифенилтетразолия хлорида и казеиновой реакции.

Назначение

Основа L.S. Differential Medium применяется для дифференциации лактобацилл и стрептококков по:

• морфологии колоний;
• восстановлению ТТХ — 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида;
• казеиновой реакции.

Среда предназначена для исследования молочных образцов, включая йогурт, а также заквасочных культур.

Состав

Количество компонентов указано на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам. Пептон HM B является эквивалентом мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация

L.S. Differential Medium используют для дифференциации Lactobacillus и Streptococcus. Среда приготовлена по рецептуре Eloy и Lacrosse и является селективной средой, поддерживающей хороший рост и дифференциацию термофильных лактобацилл и стрептококков в йогуртовых продуктах.

Йогурт — ферментированный молочный продукт, в котором Streptococcus thermophillus и Lactobacillus bulgaricus являются основными видами микроорганизмов и находятся в симбиотических отношениях. Для этих микроорганизмов различные исследователи рекомендуют соотношение 1:1.

Восстановление трифенилтетразолия хлорида в сочетании с казеиновой реакцией позволяет дифференцировать лактобациллы и стрептококки по морфологии колоний.

Соевый пептон, L-цистеина гидрохлорид, триптон, пептон HM B и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 65,3 г сухой основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление производителя 15 фунтов на кв. дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте следующие стерильные растворы, предварительно выдержанные непосредственно перед использованием при 50 °C:
   • 100 мл 10%-ного водного раствора сухого обезжиренного молока без антибиотиков, стерилизованного при 121 °C в течение 5 мин; давление производителя 15 фунтов на кв. дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа;
   • 10 мл раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида — ТТХ, FD057.
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
8. Образцы йогурта или заквасочных культур внесите в расплавленную и охлаждённую основу L.S. Differential Medium.
9. Тщательно перемешайте образцы со средой и разлейте по чашкам.
10. Инкубируйте чашки при 43 °C в течение 48 ч.

Тип образца

Тип образца: молочные продукты.

Для молочных образцов необходимо использовать соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным методическим руководствам. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией следует стерилизовать автоклавированием.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 6,53%-ного водного раствора при 25 °C соответствует pH 6,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления сухого обезжиренного молока без антибиотиков и 1%-ного раствора ТТХ FD057, затем инкубируют при 43–45 °C в течение 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.
• Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
• Рабочие характеристики среды ожидаются при соблюдении инструкции на этикетке и использовании продукта в пределах срока годности, при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраня