Основа агара для C.perfringens (O.P.S.P.) HiMedia M579-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа агара для C.perfringens (O.P.S.P.) HiMedia M579-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia — селективная агаровая основа для выделения и подсчёта Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Применяется для микробиологического анализа образцов пищевых продуктов после добавления Perfringens Supplement-I (FD011) и Perfringens Supplement-II (FD012), с анаэробной инкубацией при 37 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и количественного определения Clostridium perfringens из пищевых продуктов.

Селективные добавки поставляются по заявке:

• FD011 Perfringens Supplement-I — добавка с сульфадиазином.
• FD012 Perfringens Supplement-II — добавка с канамицином и полимиксином.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M579-500G
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 500 г
• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: основа
• Происхождение: животное
• Тип продукта: обычный
• Тип упаковки: HDPE
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2

Состав

Количество компонентов указано в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Экстракт HL эквивалентен печёночному экстракту.

Принцип действия и интерпретация результатов

Виды рода Clostridium относятся к основным причинам пищевых отравлений и заболеваний желудочно-кишечного тракта. Это грамположительные спорообразующие палочки, естественно встречающиеся в почве.

К пищевым продуктам, часто контаминированным Clostridium perfringens, относятся мясо, мясные пироги, птица, тушёные блюда и подливы. Среди представителей семейства также встречаются Clostridium botulinum, продуцирующая один из наиболее сильнодействующих известных токсинов, и Clostridium tetani, являющаяся возбудителем столбняка. C. perfringens часто выявляется при раневых инфекциях и диарейных заболеваниях.

Использование токсинов для повреждения организма-хозяина является одним из механизмов патогенности многих бактерий. Основным фактором вирулентности C. perfringens является энтеротоксин CPE, который секретируется при проникновении бактерии в кишечник хозяина и участвует в развитии пищевых отравлений и других желудочно-кишечных заболеваний.

Агар Perfringens (O.P.S.P.) разработан на основе формулы Handford и используется как селективная среда для выделения и подсчёта C. perfringens в пищевых продуктах.

Триптон, дрожжевой экстракт, соевый пептон и экстракт HL обеспечивают большинство необходимых азотистых питательных веществ, витаминов группы B и микроингредиентов для роста C. perfringens. Метабисульфит натрия и цитрат аммония железа служат индикаторами восстановления сульфата C. perfringens, сопровождающегося образованием чёрных колоний. Трис-буфер поддерживает буферную ёмкость среды.

Антибиотики сульфадиазин, олеандомицин и полимиксин B обеспечивают высокую селективность среды и подавляют сульфитредуцирующие бактерии, отличные от C. perfringens, включая Salmonella, виды Bacillus, виды Proteus, стафилококки и другие микроорганизмы.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 25,25 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое по одному флакону Perfringens Supplement-I (FD011) и Perfringens Supplement-II (FD012).
6. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Подготовка образца и проведение анализа

Тип образца: пищевые продукты.

1. Приготовьте десятикратное разведение 10%-ной гомогенизированной пробы пищевого продукта в 0,1%-ной пептонной воде M028.
2. Для определения жизнеспособных клеток или спор C. perfringens внесите по 0,1 мл различных разведений на дублированные чашки с кровяным агаром, содержащим 5 мг/л гентамицина.
3. Инкубируйте чашки при 37 °C в течение 18–24 ч в двух наборах: один набор — в анаэробных условиях, второй — в аэробных условиях.
4. В качестве альтернативного варианта внесите 1 мл разведения в 25 мл расплавленного и охлаждённого агара Perfringens (O.P.S.P.) с добавленными селективными добавками.
5. Инкубируйте посевы анаэробно при 37 °C в течение 18–24 ч.

Агар Perfringens с добавками обеспечивает высокую степень селективности и специфичности.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до коричневато-жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.
• Реакция: реакция 5,05%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,10–7,50.
• Реакция по pH: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением Perfringens Supplement-I (FD011) и Perfringens Supplement-II (FD012).

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухой среды: при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности следует уточнять в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические тесты.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с указаниями на этикетке, а также при хранении при рекомендованной температуре и использовании в пределах срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Отработанные инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками и установленными процедурами обращения с инфекционными отходами.

Комплект поставки и совместимые добавки

• Основа агара для C. perfringens (O.P.S