HiMedia M576-100G Основа RS среды

Основа сухой питательной среды HiMedia M576-100G RS для селективного выделения и идентификации Aeromonas hydrophila. Применяется для анализа клинических, пищевых и водных проб; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Среда RS разработана на основе принципа агаров с ксилозой и лизином (XL). Она предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации Aeromonas hydrophila и других грамотрицательных бактерий на основе их способности к декарбоксилированию лизина и орнитина, ферментации мальтозы и продукции H₂S.

• Питательные вещества: экстракт дрожжей служит источником питания.
• Индикация H₂S: тиосульфат натрия, L-цистеина гидрохлорид и цитрат аммония железа(III) выступают индикаторами продукции сероводорода.
• Ферментация мальтозы: большинство видов Aeromonas ферментируют мальтозу, что фиксируется индикатором бромтимоловым синим.
• Селективность: дезоксихолат натрия и новобиоцин подавляют рост грамположительных бактерий и видов Vibrio.
• Особенности: L-цистеин и L-орнитин часто декарбоксилируются энтеробактериями с образованием щелочных продуктов. Штаммы Aeromonas, положительные по лизину и орнитину, могут не иметь ярко-жёлтого окрашивания из-за этих продуктов.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворите 45,43 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
3. Охладите до 45–50 °C.
4. Асептически добавьте содержимое одной ампулы селективной добавки № 5 (FD096) после её регидратации.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа и интерпретация

• Инкубация: среду следует инкубировать при 35 °C. Это позволяет исключить рост Aeromonas salmonicida, которая может расти при более низких температурах, давая ложноположительную реакцию.
• Сроки: результаты интерпретируются в течение 24 часов. После 26 часов происходит медленный возврат жёлтого цвета к основному (зелёному).
• Дифференциация: жёлтые колонии (с чёрными центрами H₂S или без них) следует проверить на оксидазную активность, чтобы исключить виды Citrobacter.
• Ингибирование: Proteus mirabilis подавляется данной средой.

Область применения

Среда используется для работы со следующими типами образцов:

• Клинические образцы: кал.
• Пищевые образцы.
• Пробы воды.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,35 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: тёмно-зелёный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,0 ± 0,2 для 4,54 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением селективной добавки № 5 (FD096) после инкубации при 35–37 °C в течение 24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: необходимо использовать чистый изолят. Интерпретация результатов строго в течение 24 часов.
• Меры безопасности: только для профессионального использования в диагностике in vitro. Работа должна проводиться обученным персоналом с использованием средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) в соответствии с правилами микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию.