Питательная дифференциальная агаровая среда Желчный агар с инозитом и бриллиантовым зеленым HiMedia M574-500G (уп/500 гр) предназначена для селективного выделения Plesiomonas shigelloides и Aeromonas spp. из фекалий и пищевых материалов. Среда применяется для микробиологического контроля клинических, пищевых и водных образцов; использование предназначено для профессиональной диагностики in vitro.

Назначение

Желчный агар с инозитом и бриллиантовым зелёным HiMedia M574-500G предназначен для селективного выделения Plesiomonas shigelloides и видов Aeromonas из фекалий и пищевых продуктов.

• Тип питательной среды: специальная дифференциальная агаровая среда
• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Упаковка: флакон из полиэтилена высокой плотности (HDPE)
• Масса упаковки: 500 г

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии
• Пищевые образцы
• Образцы воды

Состав

Состав на 1 л среды:

Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту. Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Plesiomonas shigelloides является условно-патогенным микроорганизмом. Ferguson и Henderson впервые выделили этот микроорганизм в 1947 году на агаре МакКонки из образца фекалий. P. shigelloides выделяли из пресной воды, пресноводной рыбы, моллюсков и многих видов животных.

Инфекции человека, вызванные P. shigelloides, преимущественно передаются через воду. Микроорганизм может присутствовать в санитарно неблагополучной воде, используемой как питьевая, рекреационная или для промывания пищевых продуктов, употребляемых без приготовления или нагревания. P. shigelloides связывают с гастроэнтеритом. Значение микроорганизма как кишечного патогена предполагается на основании его преимущественного выделения из образцов стула пациентов с диареей. Идентификация проводится общепринятыми бактериологическими методами, серотипированием и определением чувствительности к антибиотикам. Другими микроорганизмами, связанными с водными кишечными инфекциями человека, являются виды Aeromonas.

Агар с инозитом, бриллиантовым зелёным и желчными солями описан Шубертом и рекомендован для селективного выделения P. shigelloides — условно-патогенного микроорганизма — и видов Aeromonas из фекалий и других пищевых продуктов. Для селективного выделения P. shigelloides разработаны различные питательные среды и методы.

Штаммы P. shigelloides растут в присутствии бриллиантового зелёного и устойчивы к желчным солям, которые обычно добавляют в питательные среды для подавления грамположительных бактерий. Большинство видов бактерий не ферментирует мезо-инозит, тогда как почти все штаммы P. shigelloides ферментируют его с образованием природного циклического полигидроксильного спирта. Шуберт использовал все три указанных свойства для разработки агара с инозитом, бриллиантовым зелёным и желчными солями.

Среда является дифференциальной для микроорганизмов, утилизирующих инозит, и микроорганизмов, его не утилизирующих:

• протеозный пептон и экстракт HM обеспечивают микроорганизмы азотистыми питательными веществами, необходимыми для роста;
• желчные соли и бриллиантовый зелёный ингибируют соответственно все грамположительные бактерии и большинство грамотрицательных палочек, за исключением колиморфных микроорганизмов;
• мезо-инозит служит ферментируемым углеводным субстратом;
• нейтральный красный является индикатором pH.

Plesiomonas может быть ошибочно идентифицирована как представитель семейства Enterobacteriaceae, если при идентификации не выполняется оксидазный тест.

Методика проведения анализа

1. В зависимости от консистенции образца и предполагаемого количества микроорганизмов разведите образцы.
2. Непосредственно выполните посев штриховым методом на агар PL (M1173) и агар с инозитом, бриллиантовым зелёным и желчными солями (M574).
3. Дополнительно внесите 10 г образца в 90 мл основы тетратионатного бульона (M032).
4. Инкубируйте чашки при 35–37 °C, а бульон — при 40 °C.
5. После 24 ч инкубации перенесите предполагаемые колонии P. shigelloides на скошенную поверхность трёхсахарного железного агара (TSI, M021) и в столбик инозитно-желатиновой среды (M1161).
6. Рост из среды M032 пересевайте штриховым методом на агар PL (M1173) и агар с бриллиантовым зелёным и желчными солями (BGBA, M574).

Приготовление среды

1. Суспендируйте 52,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка, сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам. Для образцов воды используйте методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовато-бежевый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция 5,2%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.