Агар для селективного выделения и идентификации Cryptococcus neoformans HiMedia M563-100G (уп/100 гр)

Диагностическая дифференциальная среда Агар для селективного выделения и идентификации Cryptococcus neoformans HiMedia M563-100G (уп/100 гр) производства HiMedia. Предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации Cryptococcus neoformans и его дифференциации от других видов грибов.

Принцип измерения и интерпретация

Cryptococcus neoformans представляет собой инкапсулированный базидиомицетный дрожжеподобный гриб, который может вызывать заболевания как у иммунокомпетентных лиц, так и у пациентов с иммунодефицитом (особенно при дефиците T-клеток).

Среда Caffeic Acid Ferric Citrate Test Agar (CAFC) используется для быстрой идентификации C. neoformans и его отличия от других видов Cryptococcus. Основным селективным агентом является кофейная кислота — соединение O-дифенола, которое окисляется ферментом фенолоксидазой с образованием темно-коричневого пигмента меланина. C. neoformans обладает уникальной способностью синтезировать меланин или меланиноподобный пигмент из p- и o-дифенолов, что позволяет дифференцировать его, например, от Candida albicans. Процесс пигментации происходит в присутствии цитрата железа (III).

Другие компоненты среды:

• Декстроза: ферментируемый углевод.
• Экстракт дрожжей: источник азотистых питательных веществ и витаминов группы B.
• Сульфаты и фосфаты: поддерживают буферную емкость среды.
• Цитрат железа: способствует выработке пигмента при наличии кофейной кислоты.
• Хлорамфеникол (добавляется опционально): подавляет рост сопутствующей бактериальной флоры.

Особенности интерпретации результатов

• Рост C. neoformans на данной среде следует сравнивать с ростом того же организма на другой среде, чтобы убедиться, что колонии имеют естественную пигментацию.
• При очень обильном росте выработка пигмента может быть замедлена.
• Другие виды криптококков могут стать пигментированными через 3–4 дня после посева, однако интенсивность окраски будет ниже, что позволяет отличить их от C. neoformans.
• Возможны ложноотрицательные реакции.

Область применения

Среда используется для анализа клинических образцов:

• Ткани.
• Биологические жидкости.
• Образцы мокроты.

Методика приготовления и использования

1. Растворить 33,7 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавить стерильный раствор хлорамфеникола до конечной концентрации 50 мкг/мл.
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,5 $\pm$ 0,2.

Дополнительные параметры:

Контроль качества:

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный гель с пурпурным оттенком, от прозрачного до слегка опалесцирующего.
• Реакция: pH 6,30–6,70 (для 3,37% водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 50 мкг/мл хлорамфеникола после инкубации при 25–30 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами.
• Утилизация: все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Тип среды: диагностическая, дифференциальная.