HiMedia M561F-500G Питательный агар с тирозином

Питательная агаровая среда HiMedia M561F-500G Питательный агар с тирозином — сухой порошок массой 500 г для приготовления плотной среды. Среда предназначена для культивирования и количественного определения Bacillus cereus в воде и пищевых продуктах; идентификация основана на гидролизе тирозина с образованием зоны просветления вокруг роста.

Назначение и принцип действия

Питательный агар с тирозином применяют для культивирования и количественного определения Bacillus cereus в воде и пищевых продуктах в соответствии с Руководством по бактериологическому анализу FDA, 1998 г. Среда также используется для подтверждения присутствия других видов Bacillus, включая B. cereus, B. thuringiensis, B. mycoides, B. weihenstephanensis, B. anthracis и B. megaterium, а также видов Streptomyces и Nocardia.

Bacillus cereus — аэробная спорообразующая бактерия, распространённая в почве, на овощах, а также во многих сырых и переработанных пищевых продуктах. Пищевое отравление, вызванное B. cereus, возможно при приготовлении и хранении пищи без достаточного охлаждения в течение нескольких часов перед употреблением. Случаи вспышек связывали с приготовленным мясом и овощами, варёным или жареным рисом, ванильным соусом, кремами, супами и сырыми овощными проростками.

Пептон и мясной экстракт обеспечивают необходимые питательные вещества для роста микроорганизмов. Агар выполняет функцию отверждающего компонента. Тирозин служит источником аминокислоты, гидролизируемой видами Bacillus. Bacillus cereus идентифицируют по способности гидролизовать тирозин в питательной среде, что проявляется зоной просветления в среде и вокруг бактериального роста.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Взвесьте 28,00 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; исходное давление — 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа.
4. Тщательно перемешайте среду и разлейте по 3,5 мл в стерильные пробирки, регулярно перемешивая состав.
5. Установите пробирки в наклонное положение и быстро охладите, чтобы предотвратить отделение тирозина.

Методика подтверждения Bacillus cereus

1. Приготовьте разведения 1:10 из 50 г образца в фосфатно-буферной воде для разведений Баттерфилда R094.
2. Выполните подсчёт B. cereus на чашках с агаром MYP M636F из подходящих разведений.
3. На агаре MYP B. cereus образует колонии розового цвета.
4. Подозрительные колонии пересейте на питательный агар M561F.
5. Инокулируйте всю поверхность скошенной части агара с тирозином петлёй с культурой, взятой с питательного агара.
6. Инкубируйте пробирки со скошенной средой в течение 48 ч при 35 °C.
7. Положительный результат определяют по зоне просветления в месте роста бактерий и вокруг него, что указывает на гидролиз тирозина.
8. Отрицательные пробирки со скошенной средой проверьте на наличие видимого роста и инкубируйте в общей сложности 7 суток, прежде чем считать результат отрицательным.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках со скошенной средой образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета; после затвердевания возможно появление белых частиц.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,8 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,60–7,00.
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч — 7 суток.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар.
• Масса: 500 г.
• Температурный диапазон: 10–30 °C.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.