Колумбийский агар с колистином и налидиксовой кислотой HiMedia M560A-500G (уп/500 гр)

Питательная селективная среда Колумбийский агар с колистином и налидиксовой кислотой HiMedia M560A-500G (уп/500 гр) производства HiMedia с содержанием агара 1 %. Среда предназначена для селективного выделения патогенных грамположительных кокков из клинических и не клинических образцов при добавлении 5 % дефибринированной крови; колистин и налидиксовая кислота подавляют рост грамотрицательных бактерий.

Назначение

Columbia C.N.A. Agar Base с добавлением 5 % дефибринированной крови применяется для селективного выделения патогенных грамположительных кокков, включая стафилококки и стрептококки, особенно при наличии грамотрицательных палочек, способных перерастать на обычных кровяных агарах. Среда также используется для селективного выделения Gardnerella vaginalis.

Без добавления крови среда поддерживает рост Brucella abortus, Yersinina pestis, Clostridium perfringens и всех распространённых представителей семейства Enterobacteriaceae.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Columbia Agar Base представляет собой питательную основу, содержащую 5 % дефибринированной крови. Кровь обеспечивает дополнительные питательные вещества и возможность выявления гемолитических реакций. Columbia Blood Agar Base используют как основу для приготовления сред с кровью и селективных сред, в которые добавляют различные комбинации противомикробных веществ.

Среда была разработана Ellner и соавторами. Комбинация пептонов обеспечивает более быстрый и обильный рост Streptococci, Staphylococci, Neisseria и Haemophilus, а также более выраженные гемолитические реакции.

Columbia C.N.A. Agar Base приготовлена по той же формуле, что и Columbia Agar Base, с добавлением 10 мг/л колистина и 15 мг/л налидиксовой кислоты. Эти компоненты подавляют рост грамотрицательных бактерий и поддерживают рост Staphylococci, гемолитических Streptococci и Enterococci при добавлении 5 % крови.

Биопептон и триптоза B обеспечивают обильный рост микроорганизмов и визуализацию выраженных гемолитических реакций. Баранья кровь позволяет выявлять гемолитические реакции и поставляет X-фактор, необходимый для роста многих видов бактерий. Лошадиная кровь поставляет X- и V-факторы, поэтому в большинстве лабораторий ей отдают предпочтение. Дрожжевой экстракт служит источником энергии, а кукурузный крахмал — нейтрализатором.

Среда имеет относительно высокое содержание углеводов. Поэтому β-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую гемолитическую реакцию, которую можно ошибочно принять за α-гемолиз.

Добавление колистина или полимиксина B и налидиксовой кислоты придаёт среде селективность в отношении грамположительных микроорганизмов. Колистин и налидиксовая кислота нарушают клеточную мембрану грамотрицательных организмов, а налидиксовая кислота блокирует репликацию ДНК у чувствительных грамотрицательных бактерий.

Типы образцов

• Клинические образцы: гной, соскобы с кожи и другие.
• Образцы молочной продукции.
• Образцы воды.

Подготовка, сбор и обращение с образцами

1. Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
2. Для образцов молочной продукции применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
3. Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативам.
4. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 39,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,0 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: жёлтая.
• Основная среда после добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: вишнёво-красная.
• Основная среда: прозрачная или слегка опалесцирующая.
• После добавления крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель.

Реакция

Реакция: для водного раствора с концентрацией 3,9 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Значение pH

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой и приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы предъявляют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характер роста на данной среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом особенностей применения.
3. Для дальнейшей идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Отличие от обычного кровяного агара

В отличие от обычной кровяной среды, Columbia C.N.A. Agar Base содержит колистин и налидиксовую кислоту, которые подавляют рост чувствительных грамотрицательных микроорганизмов и обеспечивают селективное выделение грамположительных кокков; при этом среда требует добавления 5 % дефибринированной крови для получения селектив