Основа дифференциального усиленного бульона для выделения клостридий HiMedia M549I (уп/500 гр)

Основа дифференциального усиленного бульона для выделения клостридий HiMedia M549I (уп/500 г) предназначена для культивирования клостридий из проб воды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 6461-1:1986.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана для выделения сульфитредуцирующих клостридий из пищевых продуктов и их количественного определения в воде методом множественных пробирок (MPN).

Механизм работы основан на следующем:

• Триптоза, мясной экстракт, дрожжевой экстракт, крахмал и ацетат натрия обеспечивают основные питательные вещества для метаболизма бактерий.
• Глюкоза выступает в качестве ферментируемого углевода, источника углерода и энергии.
• L-цистеина гидрохлорид выполняет роль восстановителя.
• Сульфит натрия и цитрат железа добавляются в качестве индикаторов.

Сульфитредуцирующие клостридии восстанавливают сульфит до сульфида, что приводит к образованию чёрного осадка в среде.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 29,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.

Добавление индикаторов непосредственно перед использованием

Необходимо добавить стерилизованный фильтрованием раствор, приготовленный путем смешивания равных объемов 4% (масс./об.) раствора сульфита натрия и 7% (масс./об.) раствора цитрата железа, в следующих пропорциях:

• 0,5 мл раствора на 25 мл среды одинарной концентрации.
• 0,4 мл и 2 мл раствора на 10 мл и 50 мл среды двойной концентрации соответственно. После добавления тщательно перемешать.

Процедура анализа (согласно ISO 6461/1-1986)

1. Внести пробу воды в среду:
   • 50 мл пробы добавить к 50 мл полной среды двойной концентрации;
   • либо 1 мл пробы добавить к 25 мл полной среды одинарной концентрации.
2. Инкубировать инокулированные флаконы при температуре 37 $\pm$1 °C в течение 44 $\pm$4 часов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$0,2.

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Оценка проводилась после инкубации в анаэробной атмосфере при 36 $\pm$1 °C в течение 44 $\pm$4 часов с добавлением 4% (масс./об.) раствора сульфита натрия и 7% (масс./об.) раствора цитрата железа.

Продуктивность

Специфичность

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб воды. Для окончательной идентификации штаммов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Комплект поставки

• Основа дифференциального усиленного бульона для выделения клостридий HiMedia M549I, 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.