Основа дифференциального усиленного бульона для выделения клостридий HiMedia M549I (уп/500 гр) — порошкообразный компонент питательной среды производства HiMedia с конечным pH 7,2 ± 0,2. HiMedia M549I предназначена для культивирования клостридий из проб воды, включая выявление и количественное определение сульфитредуцирующих клостридий методом наиболее вероятного числа.

Назначение

Основа дифференциального усиленного бульона рекомендована для культивирования клостридий из воды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6461-1:1986, устанавливающего метод выявления и подсчёта спор сульфитредуцирующих анаэробов (клостридий) в воде методом обогащения в жидкой среде.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Образцы: пробы воды
• Форма выпуска: порошок
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав среды:

Эквивалент пептонного триптического переваривания мяса.

Эквивалент мясного экстракта

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Дифференциальный усиленный клостридиальный агар первоначально описан Hirsch и Grinstead для стимуляции роста из небольшого посевного материала и получения более высокого количества клостридий. Позднее Barnes и Ingram применили среду для развития вегетативных клеток при исследовании Clostridium perfringens.

Среда предназначена для выделения сульфитредуцирующих клостридий из пищевых продуктов и их количественного определения в воде методом серийных пробирок. Дифференциальный усиленный клостридиальный бульон применяют для определения количества сульфитредуцирующих бактерий методом наиболее вероятного числа (MPN). Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6461-1:1986.

Триптоза, экстракт HM, дрожжевой экстракт, крахмал и ацетат натрия обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами для бактериального метаболизма. Глюкоза является сбраживаемым углеводом и служит источником углерода и энергии. L-цистеина гидрохлорид выполняет функцию восстановителя. Сульфит натрия и цитрат железа добавляют в качестве индикаторов. Сульфитредуцирующие клостридии образуют сульфид из сульфита, что приводит к почернению среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 29,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Непосредственно перед использованием добавьте 0,5 мл фильтр-стерилизованного раствора, приготовленного смешиванием равных объёмов 4 % раствора сульфита натрия и 7 % раствора цитрата железа, к 25 мл среды одинарной концентрации.
6. Для среды двойной концентрации добавьте соответственно 0,4 мл приготовленного раствора к 10 мл среды и 2 мл к 50 мл среды.
7. Тщательно перемешайте.

Концентрации растворов указаны в массово-объёмных процентах.

Пробоподготовка и инкубация

Для среды двойной концентрации добавьте 50 мл пробы воды к 50 мл готовой среды двойной концентрации. Для среды одинарной концентрации добавьте 1 мл пробы к 25 мл готовой среды одинарной концентрации.

Инокулированные флаконы инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Цвет и прозрачность: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка

Реакция среды

• Условия определения: водный раствор концентрацией 2,9 % (масс./об.) при 25 °C
• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

• Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Продуктивность и специфичность оценивают после инкубации в анаэробной атмосфере при 36 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч с добавлением 4 % раствора сульфита натрия и 7 % раствора цитрата железа.

Продуктивность

Специфичность

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 15–30 °C
• Ёмкость: плотно закрытый контейнер
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила микробиологической безопасности при обращении с образцами и культурами. При работе с материалом применяйте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в течение срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны