Основа среды Лёффлера HiMedia M537-500G (уп/500 гр)

Элективная основа среды Лёффлера HiMedia M537-500G (уп/500 г) для культивирования Corynebacterium diphtheriae из клинического материала. Применяется для выделения требовательных патогенных микроорганизмов из мазков носа и горла, а также для определения протеолиза, хромогенеза и продукции аскоспор.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Лёффлера предназначена для первичной и вторичной изоляции и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, особенно из образцов носоглотки. Среда способствует восстановлению вирулентности и других идентифицирующих свойств (микроскопических и колониальных), которые могли быть утрачены вследствие длительной инкубации или повторного пересева. Высокое содержание сыворотки позволяет определять протеолитическую активность организмов, а также демонстрировать пигментацию и наличие аскоспор.

Компоненты среды:

• Специальный пептон и пептон HM B: обеспечивают основные питательные вещества для роста.
• Декстроза (глюкоза): служит источником ферментируемых углеводов и энергии.

Для селективной изоляции Corynebacteria рекомендуется использовать данную среду параллельно с сывороточно-теллуритовым агаром.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 8,75 г основы в 250 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 115 °C в течение 20 минут (давление $\approx$0,69 МПа).
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 750 мл стерильной лошадиной сыворотки (RM1239).
5. Тщательно перемешайте и асептически разлейте по стерильным пробиркам.
6. Проведите окончательную стерилизацию методом сгущения (inspissation) при температуре 80–85 °C в течение 2 часов в потоке пара в течение минимум 3 последовательных дней.

Посев и анализ

• Посев: Мазки с зонда следует растирать непосредственно по поверхности среды. После инкубации мазки для микроскопии готовят с поверхности скоса.
• Тест на протеолиз: Инокулируйте скос среды и перед инкубацией залейте его бульоном тиогликолята Брюера (M019). Инкубацию проводят в течение 3–4 дней или до появления признаков протеолиза.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Формула адаптирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • Основа: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
  • После добавления сыворотки: беловатый непрозрачный раствор.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 750 мл лошадиной сыворотки после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

* — соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: клинические образцы (мазки из носоглотки и зева).
• Ограничения: для оптимального выделения C. diphtheriae необходимо получение мазка из носоглотки и зева непосредственно при сборе образца.
• Назначение: диагностика in vitro, только для профессионального использования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Комплект поставки и совместимость

• Основа среды Лёффлера (500 г).
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Рекомендуемый компонент (поставляется отдельно):
  • RM1239 Лошадиная сыворотка (Horse Serum).