Основа среды Лёффлера HiMedia M537-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Основа среды Лёффлера HiMedia M537-500G (уп/500 гр) с конечным pH 7,3±0,2. Основа применяется для культивирования Corynebacterium diphtheriae из клинических образцов и чистых культур; для приготовления требуется добавление 750 мл стерильной лошадиной сыворотки.

Назначение

Основа среды Лёффлера предназначена для культивирования Corynebacterium diphtheriae из клинического материала и чистых культур, а также для выявления пигментообразования, протеолиза и образования аскоспор.

Среда способствует первичному и вторичному выделению и культивированию требовательных патогенных микроорганизмов, особенно из образцов из носа и зева. Высокое содержание сыворотки позволяет определять протеолитическую активность микроорганизмов. Среда также применяется для выявления пигментации и аскоспор, а после длительной инкубации или многократных пересевов помогает восстановить вирулентность и другие идентификационные свойства микроорганизмов, включая микроскопические и колониальные признаки.

Для селективного выделения коринебактерий среду Лёффлера следует использовать параллельно с сывороточным теллуритовым агаром.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула эквивалентна мясному экстракту. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Специальный пептон и пептон HM B обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами для роста. Декстроза служит источником сбраживаемых углеводов и энергии.

Высокое содержание лошадиной сыворотки поддерживает рост требовательных патогенных микроорганизмов и используется для определения протеолитической активности. Среда также позволяет демонстрировать пигментацию и образование аскоспор.

Методика приготовления

1. Приготовьте суспензию из 8,75 г сухой основы в 250 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте основу автоклавированием при 115 °C в течение 20 мин. Указанный режим соответствует давлению 10 фунтов на квадратный дюйм, приблизительно 0,069 МПа.
4. Охладите основу до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 750 мл стерильной лошадиной сыворотки RM1239.
6. Тщательно перемешайте.
7. В асептических условиях разлейте среду в стерильные пробирки.
8. Стерилизуйте приготовленную среду методом дробной стерилизации в свободно текущем пару при 80–85 °C в течение 2 ч ежедневно не менее 3 последовательных дней.

Методика работы с образцами

Для посева непосредственно протрите тампоном поверхность среды. После инкубации приготовьте мазки с поверхности скошенной части среды.

Для исследования протеолиза инокулируйте скошенную часть среды и до начала инкубации залейте её тиогликолевой средой Брюера (M019). Инкубацию проводите в течение 3–4 дней или дольше — до появления признаков протеолиза.

Тип образца

Клинические образцы:

• мазки из носоглотки;
• мазки из зева.

При сборе и обработке клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

Ограничения применения

Для оптимального выделения C. diphtheriae при сборе образца следует получать мазок из носоглотки и зева.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: основа
• Конечный pH при 25 °C: 7,3±0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Производитель: HiMedia

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основа: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор светло-янтарного цвета.
• После добавления лошадиной сыворотки: непрозрачный раствор грязно-белого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора основы с массово-объёмной концентрацией 3,52 % при 25 °C: pH 7,3±0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 750 мл лошадиной сыворотки и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой основы: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.

После вскрытия необходимо хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. После каждого использования контейнер следует плотно закрывать. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Среда предназначена для диагностики вне организма и профессионального применения.

Перед открыванием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой. При работе следует использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. При обращении с образцами и культурами необходимо соблюдать правила микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности. Рекомендации по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Обеззараживание и утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать посредством автоклавирования и/или сжигания. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, перед утилизацией должны быть обеззаражены и удалены в соответствии с действующими лабораторными методиками.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед выбрасыванием.

Комплект поставки и дополнительные компоненты

В базовую поставку входит основа среды Лёффлера HiMedia M537-500G, 500 г.

Лошадиная сыворотка RM1239 поставляется по заявке и используется для приготовления среды в объёме 750 мл на указанное количество основы.