HiMedia M537-100G Основа среды Лёффлера

Основа среды Лёффлера HiMedia M537-100G производства HiMedia для культивирования Corynebacterium diphtheriae из клинических образцов и чистых культур. Применяется для выявления хромогенеза, протеолиза и продукции аскоспор; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Лёффлера предназначена для первичной и вторичной изоляции, а также культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, особенно из мазков из носа и горла. Среда способствует восстановлению вирулентности и других идентифицирующих свойств (микроскопических и колониальных), которые могли быть утрачены вследствие длительной инкубации или повторных пересевов. Высокое содержание сыворотки помогает определить протеолитическую активность организмов, а также используется для демонстрации пигментации и аскоспор.

Специальный пептон и пептон HM B обеспечивают основные питательные вещества для роста. Декстроза служит источником ферментируемых углеводов и энергии.

Область применения

Среда рекомендуется для работы с клиническими образцами (мазки из носоглотки и горла). Для селективной изоляции Corynebacteria среду Лёффлера следует использовать параллельно с сывороточно-теллуритомным агаром.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 8,75 г основы в 250 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C (давление $\approx$0,07 МПа) в течение 20 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 750 мл стерильной конской сыворотки (RM1239).
5. Тщательно перемешайте и асептически разлейте по стерильным пробиркам.
6. Стерилизуйте готовую среду методом инсписсации (уваривания) при 80–85 °C в течение 2 часов в потоке пара в течение минимум 3 последовательных дней.

Процедура анализа

• Посев: Проведите мазком непосредственно по поверхности среды. После инкубации приготовьте мазки с поверхности скоса.
• Тест на протеолиз: Инокулируйте скос и перед инкубацией залейте его средой Бруера-тиогликолятом (M019). Инкубацию следует проводить в течение 3–4 дней или дольше до появления признаков протеолиза.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2. Формула эквивалентна средам с добавлением мясного экстракта.

Общие параметры

• Внешний вид основы: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность основы: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
• Цвет и прозрачность после добавления сыворотки: грязно-белый непрозрачный раствор.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением 750 мл конской сыворотки после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами и культурами.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами.