Основа среды S для изучения подвижности HiMedia M514-500G (уп/500 гр)

Элективная порошковая основа среды S для изучения подвижности HiMedia M514-500G (уп/500 гр) применяется для определения подвижности, разжижения желатина и восстановления нитрата в одной пробирке. Основа среды используется для выделения возбудителя холеры и других вибрионов из клинического материала, при этом раствор трифенилтетразолия хлорида может ингибировать некоторые требовательные бактерии.

Назначение и область применения

HiMedia M514-500G — основа питательной среды для:

• определения подвижности бактерий;
• определения разжижения желатина;
• определения восстановления нитрата;
• выделения возбудителя холеры и других вибрионов из клинического материала.

Все три биохимических теста можно выполнить в одной пробирке. Для визуального выявления подвижности в готовую среду добавляют 1%-ный раствор 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (TTC, FD057).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 60 г основы среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление 15 фунтов на кв. дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа или 1,03 бар.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 10 мл 1%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (раствор TTC 1%, FD057).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки.

Принцип измерения и интерпретация

Подвижность бактерий является важным признаком при окончательной видовой идентификации. Перемещение бактерий обеспечивается жгутиками, количество и расположение которых могут различаться у разных видов.

Результат теста на подвижность оценивают макроскопически по наличию диффузной зоны роста, распространяющейся от линии посева:

• подвижные микроорганизмы дают диффузный рост в стороны от линии укола;
• неподвижные микроорганизмы растут вдоль линии укола, при этом окружающая среда остаётся прозрачной.

Основа среды S для изучения подвижности сформулирована в соответствии с методикой Ball и Sellers и предназначена для одновременного определения подвижности, разжижения желатина и восстановления нитрата.

Настой из сердца и триптоза обеспечивают среду азотистыми соединениями, серой, углеродом и другими необходимыми питательными веществами для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Содержание 0,1 % агара в присутствии 3,0 % желатина позволяет сохранять целостность линии укола.

Восстановление нитрата проверяют с использованием нитратных реагентов после регистрации результата теста на подвижность. Нитрат калия служит субстратом для нитратной реакции. Микроорганизмы, способные восстанавливать нитрат, демонстрируют повышенную подвижность в присутствии 0,2 % нитрата калия, особенно аэробы, для которых восстановление нитрата является обязательным процессом.

Фосфат поддерживает буферные свойства среды и оказывает стимулирующее действие на подвижность бактерий рода Proteus.

Микроорганизмы, способные продуцировать желатиназу, расщепляют или разжижают желатин. Для определения разжижения желатина пробирки с исследуемой средой после инкубации при 35–37 °C помещают в холодильник или ледяную баню.

Роль раствора TTC

Тетразолиевые соли бесцветны, но под действием восстановительных свойств растущих бактерий превращаются в нерастворимые красные комплексы формазана. Образование красного окрашивания помогает проследить распространение бактерий от линии посева и визуально выявить подвижность.

Раствор TTC не может использоваться во всех случаях, поскольку способен ингибировать некоторые требовательные бактерии.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,1%-ным агаровым гелем и 3,0%-ным желатиновым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

В пробирках в виде столбиков формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 6,0%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 1%-ного раствора TTC (FD057) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой основы: ниже 30 °C.
• Упаковка при хранении: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Комплект поставки и дополнительные компоненты

• Основа среды S для изучения подвижности HiMedia M514-500G, 500 г.
• По заявке поставляется FD057 — 1%-ный раствор трифенилтетразолия хлорида, 5 флакончиков по 10 мл.