Основа агара Миддлбрука 7Н11 HiMedia M511-500G (уп/500 гр)

Питательная агаризованная среда Основа агара Миддлбрука 7Н11 HiMedia M511-500G (уп/500 гр) — порошковая основа для приготовления среды Middlebrook 7H11 с конечным pH 6,6 ± 0,2. Применяется для выделения, культивирования и определения чувствительности микобактерий к антимикробным препаратам с добавлением ростовой добавки Middlebrook OADC и глицерина.

Назначение

Основа агара Миддлбрука 7Н11 рекомендуется для выделения, культивирования и определения чувствительности Mycobacteria к антимикробным препаратам, включая Mycobacterium tuberculosis. Тип образца — клинический материал, преимущественно мокрота.

Тип питательной среды: элективный
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав приведён в расчёте на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 10,25 г сухой основы в 450 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 2,5 мл глицерина.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин; давление по данным производителя — 15 фунтов/дюйм², ориентировочно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона ростовой добавки Middlebrook OADC (FD018).
6. Тщательно перемешайте перед разливом.

Принцип действия и интерпретация

Твёрдые среды для культивирования микобактерий могут быть яичными, например среда Левенштейна—Йенсена, или агаризованными, к которым относятся среды Миддлбрука.

Среда Миддлбрука 7Н11 представляет собой модификацию агара Миддлбрука 7Н10 и используется для выделения, культивирования и определения чувствительности M. tuberculosis. Добавление триптона усиливает рост требовательных штаммов M. tuberculosis, что позволяет использовать среду при определении чувствительности к лекарственным препаратам.

Среда обогащается ростовой добавкой Middlebrook OADC (FD018) и глицерином. В состав сред Миддлбрука входят неорганические соли, способствующие росту микобактерий. Лимонная кислота, образующаяся из цитрата натрия, удерживает неорганические катионы в растворе. Глицерин служит источником углерода и энергии.

Ростовая добавка Middlebrook OADC (FD018) содержит олеиновую кислоту, бычий альбумин, хлорид натрия, декстрозу и каталазу. Олеиновая кислота и другие длинноцепочечные жирные кислоты необходимы для метаболизма микобактерий. Некоторые свободные жирные кислоты токсичны для микобактерий, однако альбумин связывает эти жирные кислоты и предотвращает их токсическое действие. Декстроза служит источником энергии. Каталаза нейтрализует токсичные перекиси. Малахитовый зелёный частично подавляет рост других бактерий.

Mycobacteria являются строгими аэробами, поэтому при инкубации необходимо обеспечить аэробные условия и повышенное содержание CO₂. При обеззараживании образца следует соблюдать осторожность. Необходимо использовать корректно собранный материал — мокроту, а не слюну. Образцы следует обрабатывать с соблюдением мер, предотвращающих контаминацию.

Требования к образцам и обращению

Тип образца: клинический материал, мокрота.

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным регламентам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета с зеленоватым оттенком.

Реакция: водный раствор с массово-объёмной концентрацией 2,05 %, содержащий 0,5 % глицерина, при 25 °C.

pH раствора: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики определяют после добавления ростовой добавки Middlebrook OADC (FD018) и глицерина и инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Технические характеристики

Ограничения

Подготовленной среде необходимо дать отстояться перед измерением pH. Если pH проверяют сразу после приготовления и получают значение за пределами спецификации, измерение следует повторить через некоторое время после стабилизации среды для получения окончательного значения pH.

Рабочие характеристики среды ожидаются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

Условия хранения и срок годности

Сухую среду хранят в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Продукт необходимо использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон следует плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Из-за гигроскопичности порошка нарушение условий хранения может привести к образованию комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры пред