Основа эскулинового агара с азидом и канамицином HiMedia M510A

Основа питательной среды HiMedia M510A — эскулиновый агар с азидом и канамицином для селективного выделения энтерококков из пищевых и молочных образцов. HiMedia M510A применяется для выделения и идентификации стрептококков группы D; гидролиз эскулина выявляется по почернению среды вокруг колоний.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D, включая энтерококки, из пищевых продуктов и молочных образцов.

Состав

Состав приведён в расчёте на 1 л среды.

Итоговое значение pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда с канамицином, эскулином и азидом разработана по методикам Mossel и предназначена для обнаружения энтерококков в пищевых продуктах. Среда также применялась для метода погружных планшетов при бактериологическом контроле пищевых продуктов.

• Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают энтерококки азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
• Сульфат канамицина и азид натрия являются селективными ингибирующими компонентами.
• Эскулин и цитрат аммония и железа образуют индикаторную систему для выявления стрептококков, гидролизующих эскулин.
• Гидролиз эскулина проявляется почернением зон вокруг колоний.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 21,32 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки KS Selective Supplement FD146.
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и проведение анализа

Для пищевых образцов смешайте 1 г или 1 мл продукта с предварительно охлаждённым разбавителем — триптоновой водой M463 — и приготовьте десятичные разведения.

Десятичные разведения инокулируют в бульон с канамицином, эскулином и азидом M776, затем инкубируют при 35 °C в течение 16–24 ч.

Тип образцов

Тип образцов: пищевые продукты и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета с пурпурным оттенком, формирующийся в чашках Петри.

Реакция среды

Реакция: реакция 4,26%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки KS Selective Supplement FD146 и инкубации при 35–37 °C или 42 °C в течение 18–24 ч.

Примечание: * — соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: элективная.
• Назначение изделия: основа.
• Итоговое значение pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе.
• Порошок обладает гигроскопичностью; при недостаточно плотном закрытии возможно образование комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда предназначена для первичного выделения микроорганизмов. Для полной идентификации необходимо проведение дополнительных подтверждающих тестов.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать с применением автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки и совместимые компоненты

По заявке поставляется селективная добавка с сульфатом канамицина KS Selective Supplement FD146.

Для приготовления среды используется регидратированное содержимое одного флакона FD146 на 500 мл приготовленной основы.