Эскулиновый агар с азидом и канамицином HiMedia M510-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Эскулиновый агар с азидом и канамицином HiMedia M510-500G (уп/500 гр) — агар для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Среда применяется для выявления энтерококков в пищевых и молочных образцах, при этом гидролиз эскулина выявляют по почернению среды вокруг колоний.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов, включая молочные образцы.

Энтерококки относятся к аутохтонной микрофлоре человека и животных. Фекальные стрептококки, несущие антигены Lancefield группы D, рассматриваются как энтерококки и могут загрязнять различные пищевые продукты, особенно продукты животного происхождения.

Эскулиновый агар с азидом и канамицином разработан по методике Mossel и соавторов для выявления энтерококков в пищевых продуктах. Среда также применялась в методе погружных пластин для бактериологического мониторинга пищевой продукции. Среду успешно использовали для выделения энтерококков, устойчивых к гликопептидам, из клинических образцов и пищевых продуктов.

Универсальной питательной среды, позволяющей выделять все штаммы энтерококков, не существует. Если требуется не предположительный подсчёт, а окончательная идентификация, все выделенные изоляты необходимо подтвердить дополнительными тестами.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Концентрация при приготовлении: 44,67 г/л
• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: агар
• Происхождение: животное

Принцип действия и интерпретация результатов

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают энтерококки необходимыми питательными веществами. Сульфат канамицина и азид натрия являются селективными ингибирующими компонентами.

Эскулин и цитрат аммония железа образуют индикаторную систему для выявления стрептококков, гидролизующих эскулин. Вокруг колоний таких микроорганизмов формируются чёрные зоны. Почернение обусловлено образованием чёрных железофенольных соединений из продуктов гидролиза эскулина и ионов железа.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 44,67 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте среду в необходимом объёме.

Методика выявления энтерококков в пищевых образцах

1. Добавьте 1 г или 1 мл гомогенизированного пищевого образца к 9 мл предварительно охлаждённого разбавителя — триптонной воды M463.
2. Приготовьте десятикратные последовательные разведения.
3. Инокулируйте полученные разведения в бульон с канамицином, эскулином и азидом M776.
4. Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 16–24 ч.
5. При почернении среды выполните пересев штриховым методом на агар M510.
6. После инкубации проведите подтверждающие тесты.

Тип образца

• Пищевые образцы
• Молочные образцы

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Сухой порошок от кремового до жёлтого цвета с зеленоватым оттенком; однородный, сыпучий, без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с фиолетовым оттенком.

Реакция

• Условия определения: водный раствор с концентрацией 4,47 % масс./об. при 25 °C
• pH: 7,0 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Условия хранения после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон
• Требования к помещению: сухое вентилируемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения

Продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать, чтобы предотвратить образование комков. Неправильное хранение может привести к комкованию порошка. После каждого использования ёмкость следует герметично закрывать. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока