HiMedia M510-100G Агар с канамицином, эскулином и азидом

Питательная агаровая среда HiMedia M510-100G Агар с канамицином, эскулином и азидом предназначена для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Среда применяется для анализа пищевых и молочных образцов, при этом гидролиз эскулина выявляют по почернению среды вокруг колоний, а дальнейшую идентификацию проводят дополнительными биохимическими и серологическими тестами.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов, включая пищевые и молочные образцы. Энтерококки группы D по антигенам Лансфилда являются фекальными стрептококками и могут загрязнять различные пищевые продукты, особенно продукты животного происхождения.

Среда также применялась для выделения энтерококков, устойчивых к гликопептидам, из клинических образцов и пищевых продуктов. Универсальной питательной среды, обеспечивающей выделение всех штаммов энтерококков, не существует; если требуется не предположительный подсчёт, все выделенные изоляты необходимо подтверждать дополнительными тестами.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация результатов

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают энтерококки необходимыми питательными веществами. Сульфат канамицина и азид натрия являются селективными ингибирующими компонентами среды.

Эскулин и цитрат аммонийного железа образуют индикаторную систему для выявления стрептококков, гидролизующих эскулин. Такие микроорганизмы формируют чёрные зоны вокруг колоний. Почернение обусловлено образованием чёрных железофенольных соединений из продуктов гидролиза эскулина и ионов железа.

Среда на основе канамицина, эскулина и азида сформулирована по методике Mossel и соавторов для выявления энтерококков в пищевых продуктах. Методика также использовалась для контактно-погружного метода бактериологического мониторинга пищевых продуктов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 44,67 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте среду в необходимом объёме.

Методика анализа пищевых образцов

1. Добавьте 1 г или 1 мл гомогенизированного пищевого образца в 9 мл предварительно охлаждённого разбавителя — триптонной воды M463.
2. Приготовьте десятикратные разведения образца.
3. Инокулируйте полученные разведения в бульон с канамицином, эскулином и азидом M776.
4. Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 16–24 ч.
5. При появлении почернения среды выполните пересев штриховым методом на агар M510.
6. После инкубации проведите подтверждающие тесты.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам и лабораторным процедурам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с биологическими материалами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Необходимо выполнять дополнительные биохимические и серологические тесты для дальнейшей идентификации микроорганизмов.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый порошок с зеленоватым оттенком, однородный, сыпучий, без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета с фиолетовым оттенком.

Реакция

Реакция 4,47%-ного массо-объёмного водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агаровая питательная среда.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение сырья: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Материал упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности).
• Масса: 100 г.
• Температура хранения: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере, а приготовленную среду — при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировав