Агар для определения чувствительности к химиопрепаратам HiMedia M502-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Агар для определения чувствительности к химиопрепаратам HiMedia M502-500G (уп/500 гр) — DST-агар для тестирования чувствительности микроорганизмов к антибиотикам и химиотерапевтическим средствам, включая прихотливые виды. Среда применяется для анализа клинических изолятов Neisseria, Streptococcus и Haemophilus после обогащения кровью; сниженная активность тимидина ограничивает использование среды в качестве первичной изоляционной.

Назначение

Diagnostic Sensitivity Test Agar (D.S.T. Agar) применяется как питательная среда для определения чувствительности к антибиотикам прихотливых патогенов, включая виды Neisseria, Streptococcus и Haemophilus, при обогащении кровью клинических образцов.

Среда предназначена для диагностики и тестирования чувствительности микроорганизмов к антибиотикам и химиотерапевтическим средствам, включая сульфонамиды. Для менее требовательных микроорганизмов — Micrococci, Salmonella, Shigella, колиформных бактерий и видов Proteus — среда может использоваться без крови. Для прихотливых микроорганизмов, включая Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, альфа- и бета-гемолитические стрептококки, требуется обогащение кровью.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707
• Форма выпуска: 500 г

Состав

Формула стандартизирована и скорректирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Содержание сухих веществ настоя HMV эквивалентно содержанию сухих веществ телячьего настоя.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Приготовление среды

1. Суспендируйте 43,04 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на квадратный дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Для приготовления кровяного агара охладите основу до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови лошади.
6. Осторожно перемешайте вращательными движениями.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Питательная ценность среды обусловлена наличием аминокислотных оснований и глюкозы. Соли в составе предотвращают резкие сдвиги pH, вызванные образованием кислот; такие сдвиги могут влиять на результаты теста чувствительности, гемолитические реакции и значения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антимикробных препаратов, чувствительных к pH.

Аневрин служит источником витамина и улучшает рост ряда микроорганизмов, особенно стафилококков. Агар в составе специально обработан для беспрепятственной диффузии антимикробных веществ из дисков. Добавление аденина, гуанина, урацила и ксантина улучшает характеристики среды при тестировании чувствительности к антибиотикам.

Содержание реакционноспособных тимидина и тимина должно быть достаточно низким, чтобы исключить антагонизм триметоприма и сульфонамидов, являющийся критичным фактором для сред, предназначенных для определения чувствительности к антимикробным препаратам. Необходимое снижение достигается добавлением лизированной крови лошади в среду для определения чувствительности. Уровень тимидина дополнительно снижается под действием тимидинфосфорилазы, высвобождаемой из лизированных эритроцитов лошади. Микроорганизмы, зависящие от тимидина, не растут при его отсутствии либо растут слабо на средах с пониженным содержанием тимидина.

Суспензию исследуемых микроорганизмов распределяют по поверхности среды. Диски для определения чувствительности размещают на засеянной поверхности на одинаковом расстоянии друг от друга и инкубируют при 37 °C в течение 18 ч. Регистрируют полученные зоны ингибирования роста.

Сниженная активность тимидина влияет на характеристики среды при использовании для первичной изоляции микроорганизмов.

Типы образцов

Для исследования используют клинические образцы:

• изолированные культуры из крови;
• мочу;
• образцы из дыхательных путей;
• другой клинический материал.

Отбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Соли в составе предотвращают резкие сдвиги pH, вызванные образованием кислот, однако изменения pH могут влиять на результаты теста чувствительности, гемолитические реакции и значения МИК антимикробных препаратов, чувствительных к pH.
2. Некоторые прихотливые микроорганизмы могут не расти.
3. Плотность инокулята влияет на размер зоны ингибирования: слишком плотный инокулят может привести к уменьшению зон, а недостаточный рост — к их увеличению.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 7 % масс./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,3 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения в скобках соответствуют номерам WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Гигроскопичность среды может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности могут быть указаны в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

С