Декарбоксилазный агар HiMedia M501-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Декарбоксилазный агар HiMedia M501-500G (уп/500 гр) — агаровая основа для биохимической дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и других грамотрицательных палочек с добавлением L-лизина, L-аргинина или L-орнитина в гидрохлоридной форме.

Назначение

Декарбоксилазный агар HiMedia M501-500G предназначен для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоту, добавленную в питательную среду.

Среда используется для идентификации представителей Enterobacteriaceae и других грамотрицательных палочек. Образование орнитиндекарбоксилазы особенно информативно при дифференциации видов Enterobacter и Klebsiella: представители первого рода продуцируют этот фермент и подвижны, тогда как представители второго рода неподвижны и не синтезируют орнитиндекарбоксилазу.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2.

Принцип измерения и интерпретация

Основа декарбоксилазного агара разработана по принципу, описанному Moeller, для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают бактериальный рост азотистыми питательными веществами. Декстроза является сбраживаемым углеводом. Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH и изменяет цвет с пурпурного на жёлтый в кислой среде.

Активность декарбоксилаз стимулируется кислым pH. Аминокислоты декарбоксилируются или разлагаются с образованием соответствующих аминов. Образование аминов повышает pH среды, из-за чего индикатор и среда изменяют цвет с жёлтого на пурпурно-фиолетовый.

Каждый изолят необходимо инокулировать также в пробирку с базовой средой без аминокислоты. Если среда в этой пробирке становится щелочной, результат теста недействителен. Контакт среды с воздухом может вызвать ощелачивание; для получения оптимальных результатов инокулированные пробирки рекомендуется покрывать слоем стерильного минерального масла.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 24,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Добавьте 5 г требуемой L-аминокислоты на 1 л среды. Допустимые аминокислоты: L-лизин, L-аргинин или L-орнитин в гидрохлоридной форме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.
8. При использовании гидрохлорида L-орнитина необходимо повторно отрегулировать pH.

Тип образца

Клинические образцы:

• изоляты из фекалий;
• другие клинические изоляты.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для дальнейшей идентификации совместно с декарбоксилазным тестом необходимо выполнять другие биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется прозрачный гель пурпурного цвета.

Реакция

Реакция 2,4%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,5 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,30–6,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и нанесением сверху стерильного минерального масла.