Цитратный агар Кристенсена с сульфитом HiMedia M495-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Цитратный агар Кристенсена с сульфитом HiMedia M495-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Применяется для дифференциации микроорганизмов по способности использовать цитрат в качестве единственного источника углерода и по продукции сероводорода (H₂S).

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой модификацию железного агара Кристенсена. Она позволяет определить способность представителей родов Escherichia, Enterobacter, Citrobacter и Salmonella, а также Alkalescens-Dispar использовать цитрат как источник энергии, в то время как виды Shigella не способны к этому процессу.

Механизм утилизации цитрата

Организмы, метаболизирующие цитрат, расщепляют его до оксалоацетата и ацетата с помощью фермента цитритазы. Затем оксалоацетатдекарбоксилаза превращает оксалоацетат в пируват и CO₂. CO₂ взаимодействует с натрием и водой, образуя карбонат натрия — щелочное соединение. Это приводит к повышению pH среды, в результате чего индикатор феноловый красный меняет цвет с оранжево-красного на малиновый (cerise). Малиновый цвет свидетельствует о положительном результате утилизации цитрата.

Определение продукции H₂S

Восстановление цитрата железа (III) аммония до сульфида железа организмами, продуцирующими H₂S, проявляется почернением среды. Тиосульфат натрия усиливает продукцию H₂S. При длительной инкубации сильные положительные культуры окрашивают весь столбик в чёрный цвет. Некоторые виды Salmonella, например Salmonella Typhi, проявляют слабую активность и требуют от 2 до 5 дней для продукции сульфита водорода.

Роль компонентов

• Экстракт дрожжей: обеспечивает необходимые питательные вещества, в основном азотистые соединения и витамины.
• L-цистеина гидрохлорид: восстановитель.
• Декстроза: ферментируемый углевод.
• Цитрат натрия: источник энергии для цитрат-положительных организмов.

Важное ограничение: при инокуляции следует избегать слишком высокой посевной дозы, так как это может привести к ложноположительному результату.

Методика приготовления и стерилизации

1. Суспендируйте 24,29 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 118–121 °C (давление ≈0,08–0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скоса с глубоким столбиком.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Физико-химические свойства

• Значение pH (при 25 °C): 6,7 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,50–6,90
• Внешний вид порошка: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета
• Внешний вид готовой среды: оранжево-красный, очень слабо опалесцирующий гель (в пробирках в виде скоса)
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,4 % агаром

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Область применения

Среда используется в микробиологических лабораториях для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и дифференциации патогенных штаммов (например, отделение Salmonella от Shigella).