Желчно-эскулиновый агар с азидом натрия HiMedia M493-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Желчно-эскулиновый агар с азидом натрия HiMedia M493-500G (уп/500 гр) для селективного выделения и предварительной идентификации фекальных стрептококков (энтерококков). Применяется для анализа клинических образцов (фекалий) и проб пищевых продуктов; содержит азид натрия для подавления роста сопутствующей микрофлоры.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на способности энтерококков и стрептококков группы D гидролизовать эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа (III), образуя коричнево-черный осадок.

• Положительная реакция: появление зоны темно-коричневого или черного осадка вокруг колоний. При использовании среды в виде скоса положительным считается почернение более половины скоса в течение 24–48 часов.
• Отрицательная реакция: полное отсутствие почернения или почернение менее половины скоса за 24–48 часов.

Среда является модификацией желчно-эскулинового агара: концентрация желчи снижена, и добавлен азид натрия для усиления селективности. Триптон, протеоз-пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Желчь и азид натрия ингибируют рост большинства других бактерий.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 56,65 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C, тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Процедура посева и инкубации

1. Прямой посев: инкубация при 35–37 °C в течение 18–24 часов.
2. Метод мембранной фильтрации (для проб воды):
   • Образцы фильтруют через мембранные фильтры, которые асептически помещают на среду Slanetz and Bartely (M612I).
   • Красные или бордовые колонии, обнаруженные после инкубации, подтверждают путем переноса мембраны на чашку с желчно-эскулиновым агаром с азидом натрия, предварительно нагретую до 44 °C.
   • Инкубация проводится при 44 $\pm$ 0,5 °C в течение 2 часов.
   • Все типичные колонии с коричнево-черным окрашиванием окружающей среды подсчитываются как кишечные энтерококки.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,1 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель с голубоватым оттенком (в чашках Петри)

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Результаты после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и ограничения

• Типы образцов: фекалии, пищевые продукты.
• Ограничения: индивидуальные организмы могут проявлять вариативность роста. Рекомендуется валидация среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).
• Особенности: некоторые виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный результат на этой среде. Стрептококки группы Viridans иногда проявляют слабую положительную реакцию.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Предупреждение: азид натрия может образовывать взрывоопасные азиды металлов при контакте с материалами водопроводных труб. Рекомендуется промывать слив большим количеством воды.
• Безопасность: только для профессионального использования (In Vitro диагностика). Использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Дополнение: для усиления роста энтерококков в среду можно добавить 50 мл/л конского сыворотки.