HiMedia M493-100G Агар с желчью, эскулином и азидом

Питательная микробиологическая среда HiMedia M493-100G Агар с желчью, эскулином и азидом производства HiMedia в порошковой форме предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации фекальных стрептококков. Среда применяется для анализа клинических и пищевых образцов, хранится при температуре 10–30 °C и содержит желчь и азид натрия для подавления большинства сопутствующих бактерий.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации фекальных стрептококков, включая энтерококки.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту. Желчь эквивалентна оксгаллу. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,65 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, приблизительно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Меры предосторожности при работе с азидом натрия

Азид натрия способен образовывать взрывоопасные азиды металлов при контакте с материалами трубопроводов. Для смыва одноразовых материалов рекомендуется использовать достаточное количество воды.

Принцип измерения и интерпретация

Стрептококки группы D содержат в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Представители бывшей группы D, являющиеся преобладающими нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, называются фекальными стрептококками или энтерококками.

Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа, образуя коричневато-чёрный осадок. Вокруг колоний формируется зона чёрного осадка, которая используется для предварительной идентификации микроорганизмов.

Среда с желчью, эскулином и азидом представляет собой модификацию среды с желчью и эскулином: концентрация желчи снижена, в состав дополнительно введён азид натрия.

Триптон, протеозопептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ. Желчь и азид натрия подавляют рост большинства других сопутствующих бактерий.

Если среду разливают в пробирки в виде скошенного агара, положительной реакцией считают почернение более половины скошенной поверхности в течение 24–48 ч. Если почернение полностью отсутствует либо в течение 24–48 ч почернело менее половины скошенной поверхности, реакцию считают отрицательной.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также могут давать положительную реакцию на желчь и эскулин. Для усиления роста энтерококков среду можно дополнить лошадиной сывороткой в концентрации 50 мл/л.

Методика исследования проб воды

Подозрительные пробы воды фильтруют через мембранные фильтры. Мембранные фильтры в асептических условиях помещают на среду Сланеца и Бартли (M612I). Красные или бордовые колонии, выявленные после инкубации, дополнительно подтверждают асептическим переносом мембранного фильтра на чашку со средой с желчью, эскулином и азидом, предварительно нагретую до 44 °C.

После посева проводят инкубацию при температуре 44 ± 0,5 °C в течение 2 ч.

Все типичные колонии, вызывающие коричнево-чёрное окрашивание окружающей среды, подсчитывают как кишечные энтерококки.

Прямое выделение энтерококков

Среду можно использовать для прямого выделения энтерококков без мембранного фильтра. Инкубацию проводят при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Тип образца

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать неодинаковые характер роста на среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется провести валидацию среды с учётом специфических требований пользователя.

Оценка эксплуатационных характеристик

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,67 % масс./об. при 25 °C; pH 7,1 ± 0,2.

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Контейнер должен быть плотно закрыт.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M493-100G
• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: животное
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH по контролю качества: 6,90–7,30

Техническое отличие от среды с желчью и эскулином

Среда M493 представляет собой модификацию среды с желчью и эскули