HiMedia M492-100G Агар с бриллиантовым зеленым и сульфамидом

Питательная агаровая среда HiMedia M492-100G «Агар с бриллиантовым зеленым и сульфамидом» для выделения и обнаружения бактерий рода Salmonella в пищевых продуктах имеет конечный pH 6,9 ± 0,2. Среда применяется для анализа яиц и яичных продуктов, при этом не поддерживает обильный рост Salmonella Typhi и требует подтверждения выделенных микроорганизмов дополнительными биохимическими тестами.

Назначение

Высокоселективная агаровая среда предназначена для выделения и обнаружения бактерий рода Salmonella в пищевых образцах, особенно в яйцах и яичных продуктах.

Тип образцов

• Пищевые образцы: яйца и яичные продукты.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 5,9 % масс./об.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агаровая питательная среда.
• Физическая форма: порошок.
• Масса: 100 г.
• Тип упаковки: HDPE.
• Происхождение: животное.
• Диапазон хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.

Принцип действия и интерпретация

Бактерии рода Salmonella широко распространены в окружающей среде. В организм животных они попадают через желудочно-кишечный тракт при употреблении контаминированных кормов. В мясной и пищевой промышленности применяются строгие правила содержания животных, а непригодное сырьё перерабатывается или утилизируется. В результате микроорганизмы вновь попадают в окружающую среду и сохраняются в глобальной пищевой цепи.

Скорлупа яйца и его содержимое обычно стерильны в момент откладки. Впоследствии яйцо может быть контаминировано при контакте с гнездом, полом и подстилкой других птиц.

Бактерии рода Salmonella обычно являются возбудителями самоограничивающегося гастроэнтерита. В отдельных случаях они могут вызывать брюшной тиф. Контаминация бактериями рода Salmonella наиболее часто встречается в птицеводческой отрасли.

Агар с бриллиантовым зелёным и сульфамидом используется для селективного выделения и обнаружения бактерий рода Salmonella в пищевых продуктах, особенно в яйцах и яичных продуктах. Агар с бриллиантовым зелёным первоначально разработан Кристенсеном, Лестером и Яргенсом. Позднее Осборн и Стоукс модифицировали исходную рецептуру, добавив 0,1 % сульфапиридина натрия. Добавление сульфапиридина повысило селективность среды.

Цвет колоний Salmonella может варьировать от красного до розового и белого в зависимости от времени и продолжительности инкубации, а также от штамма Salmonella.

Дрожжевой экстракт и протеозопептон обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами, аминокислотами и витаминами. Бриллиантовый зелёный подавляет грамположительные бактерии и большинство грамотрицательных палочек, ферментирующих лактозу или сахарозу. Сульфапиридин повышает селективность среды.

Среда не поддерживает обильный рост Salmonella Typhi. Бактерии рода Shigella также не растут на агаре с бриллиантовым зелёным и сульфамидом.

Из-за высокой селективности среды одновременно следует использовать менее ингибирующую среду для восстановления микроорганизмов из предварительно обогащённой культуры — селенит-цистиновую среду.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 59,09 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов-силы на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не стерилизуйте и не нагревайте среду дольше или сильнее установленного режима, чтобы сохранить её селективность.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель зеленовато-коричневого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 5,9 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Сухой препарат хранить при 10–30 °C в плотно закрытой таре.
• Приготовленную среду хранить при 20–30 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

1. Не автоклавируйте среду более 15 мин, поскольку это снижает её селективность.
2. Для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические тесты.
3. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать на среде вариабельные характеристики роста.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в течение срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Меры безопасности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки

• Агар с бриллиантовым зелёным и сульфамидом HiMedia M492-100G, 100 г.

Техническое отличие от менее селективных сред

Агар с бриллиантовым зелёным и сульфамидом содержит бриллиантовый зелёный и сульфапиридин натрия, повышающие селективность среды; для восстановления микроорганизмов из предварительно обогащённых культур рекомендуется параллельно применять менее ингибирующую селенит-цистиновую среду.