Диагностическая питательная среда Сердечно-мозговой агар с дрожжевым экстрактом HiMedia M470-500G (уп/500 г) предназначена для культивирования микоплазм и L-форм бактерий. Среда используется для рутинных исследований распределения, среды обитания и патогенеза микоплазм, плевропневмоподобных организмов (PPLO) и L-форм бактерий.
Область применения
Среда рекомендуется для выделения PPLO из образцов уретрита, язв полового члена и мазков с шейки матки, а также для выделения L-форм Corynebacterium, Neisseria и Streptococcus. Применяется для обнаружения контаминации PPLO в клеточных линиях и культурах тканей, а также при работе с мембранными фильтрами.
Типы исследуемых образцов
Для анализа используются клинические образцы:
- мазки мокроты;
- ткани;
- жидкость при бронхоальвеолярном лаваже (БАЛ);
- бронхиальные промывания;
- спинномозговая жидкость (СМЖ).
Принцип измерения
Среда BYE (Barile, Yaguchi и Eveland) содержит протеоз-пептон, инфузии из сердца говядины и мозга телёнка, а также дрожжевой экстракт. Данный состав обеспечивает необходимые углерод, азот, витамины и другие факторы роста, требуемые для метаболизма микоплазм, плевропневмоподобных организмов и L-форм бактерий.
Методика приготовления и использования
Приготовление среды
- Суспендируйте 52,0 г порошка в 850 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
- Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
- Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 150 мл стерильной крови или сыворотки человека или животного.
- Аккуратно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.
Порядок проведения анализа
- Посевы выполняются в двух повторностях.
- Один набор инкубируют в аэробных условиях, второй — в анаэробных в течение 48 часов и более.
- Рост обычно наблюдается через 3–5 дней; отрицательный результат регистрируется через 10 дней.
- Анаэробные условия наиболее критичны в первые 3 дня; вторичные пересадки могут инкубироваться аэробно.
Технические характеристики
Состав, г/л:
| Компонент | г/л |
|---|
| Протеоз-пептон | 10,000 |
| Инфузия из мозга телёнка | 8,000 |
| Инфузия из сердца говядины | 9,500 |
| Декстроза (глюкоза) | 2,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Гидрофосфат натрия двунатриевый | 2,500 |
| Дрожжевой экстракт | 2,000 |
| Агар | 13,000 |
- Конечный pH (при 25 °C): 7,9 ± 0,2
- Диапазон pH: 7,70–8,10
- Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета
- Цвет и прозрачность готовой среды: жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
- Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,3 % агаром
Дополнительные параметры
| Параметр | Значение |
|---|
| Происхождение компонентов | Животное |
| Тип продукта | Регулярный |
| Физическая форма | Порошок |
| Тип упаковки | ПНД (HDPE) |
Культуральные характеристики
Характеристики наблюдаются при добавлении сыворотки в увлажненных анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 5–10 дней.
| Организм | Рост |
|---|
| Mycoplasma bovis ATCC 25523 | хороший — обильный |
| Mycoplasma gallinarium ATCC 19708 | хороший — обильный |
| Mycoplasma pneumoniae ATCC 15531 | хороший — обильный |
| Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 | хороший — обильный |
Условия эксплуатации и хранения
- Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
- Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
- Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
Ограничения и меры предосторожности
- Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
- Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
- Работа с клиническими образцами должна проводиться в соответствии с установленными руководствами по безопасности и микробиологической практике.
- Загрязнённые материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию.
Совместимость и сертификация
- Сертификат: ФСЗ 2009/03706.