HiMedia M467F-500G Агар Хектоена энтерик с 1.2% агара

HiMedia·Арт.: 0049909·Арт. произв.: M467F-500G

HiMedia M467F-500G Агар Хектоена энтерик с 1.2% агара

Name: HiMedia M467F-500G Агар Хектоена энтерик с 1.2% агара
Brand: HiMedia
SKU: 0049909
Price: 12517 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ12 517 руб.

Дифференциально-диагностическая среда HiMedia M467F-500G Агар Хектоена энтерик с 1,2 % агара (производство HiMedia) предназначена для изоляции видов Shigella и Salmonella из проб пищевых продуктов. Состав и критерии эффективности среды соответствуют стандартам ISO 21567:2004, ISO 6579-1:2017(E), APHA и FDA BAM.

Описание

Принцип измерения и интерпретация

Агар Хектоена энтерик (HE) используется для дифференциального выделения Salmonella и Shigella из пищевых образцов. Повышенная концентрация углеводов и пептона снижает ингибирующий эффект желчных солей и индикаторов, что обеспечивает хороший рост целевых патогенов при подавлении нормальной кишечной микрофлоры.

В состав среды входят три углевода: лактоза, сахароза и салицин. Высокое содержание лактозы облегчает визуализацию патогенов и минимизирует проблему задержки ферментации лактозы. Салицин ферментируется многими колиформами, включая те, которые не расщепляют лактозу и сахарозу.

Комбинация цитрата аммония железа(III) и тиосульфата натрия позволяет обнаруживать продукцию сероводорода (H₂S), что проявляется в виде черных центров в колониях. Система индикаторов (кислая фуксин и бромтимоловый синий) обладает более низкой токсичностью по сравнению с другими средами для энтеробактерий, что улучшает извлечение патогенов.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

Суспендируйте 75,67 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ И НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ.
Охладите до 45–50 °C.
Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Работа с образцами по FDA BAM

Культивируйте подозрительный образец в бульоне тетратионате (M032F) в течение ночи.
Перемешайте пробу (используйте вортекс для пробирок).
Нанесите петлей объемом 10 мкл (3 мм) инкубированный бульон на агар Хектоена энтерик с 1,4 % агара.
Появление сине-зеленых или синих колоний (с черными центрами или без них) указывает на присутствие Salmonella. Некоторые культуры Salmonella могут образовывать колонии с крупными глянцевыми черными центрами или быть полностью черными.

Обработка по ISO 21567:2004 и APHA

Обогащение: Добавьте определенную массу или объем тестовой порции к 9 мл бульона Шигелла, содержащего 0,5 мкг новобиоцина (разведение 1:10). Инкубируйте в анаэробных условиях при 41,5 ± 1 °C в течение 16–20 ч.

Посев: Используя полученные культуры, инокулируйте поверхность агара HE. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 20–24 ч. Проведите анализ типичных колоний Shigella и выполните биохимические тесты для подтверждения.

Обработка по ISO 6579-1:2017

Предварительное обогащение: Образцы (25 г в 225 мл) предварительно обогащают в буферной пептонной воде (M14941) при температуре 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Селективное обогащение: 0,1 мл предварительно обогащенного образца инокулируют в 10 мл бульона RVS (M1448I) или агар MSRV (M1428) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Затем 1 мл культуры переносят в бульон MKTTn (M14961) и инкубируют при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.

Изоляция: Полученную культуру высевают на модифицированный агар XLD (M0311) и инкубируют при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно проводят посев на второй изоляционный агар: агар Хектоена энтерик, бисмит-сульфитный агар или бриллиант-зеленый агар.

Подтверждение: Для окончательного подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Состав (г/л)

ISO 21567:2004 BAM Media 61	Hektoen enteric (HE) agar	Hektoen enteric agar, w/1.4% agar	M467F
Компонент	г/л	Компонент	г/л
Энзимный гидролизат мяса/Пептон	12,000	Пептон	12,000
Экстракт дрожжей	3,000	Экстракт дрожжей	3,000
Хлорид натрия	5,000	Хлорид натрия	5,000
Желчные соли №3	9,000	Смесь желчных солей	9,000
Лактоза	12,000	Лактоза	12,000
Сахароза	12,000	Сахароза	12,000
Салицин	2,000	Салицин	2,000
Тиосульфат натрия	5,000	Тиосульфат натрия	5,000
Цитрат аммония железа(III)	1,500	Цитрат аммония железа(III)	1,500
Бромтимоловый синий	0,065	Бромтимоловый синий	0,065
Кислая фуксин	0,100	Кислая фуксин	0,100
Агар	12-18/14	Агар	14,000
Конечный pH (при 25 °C) (после нагрева)	7,5 ± 0,2	Конечный pH (при 25 °C)	7,5 ± 0,2

Дополнительные параметры

Параметр	Значение
Происхождение	Животное
Тип продукта	Регулярный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)

Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,4 % агаром.
Цвет и прозрачность готовой среды: зеленый цвет, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
pH (7,5 % в/в водный раствор при 25 °C): 7,30–7,70 (номинал 7,5 ± 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35 °C в течение 22–26 часов.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Выход	Цвет колонии
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	сине-зеленые или синие, могут иметь черные центры (продукция H₂S)
Salmonella Typhi ATCC 6539	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	зеленовато-синие, могут иметь черные центры (продукция H₂S)
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	зеленовато-синие, могут иметь черные центры (продукция H₂S)
Escherichia coli ATCC 25922	50–100	умеренный	20–30 %	оранжевые (возможен осадок желчных солей)
Klebsiella aerogenes ATCC 13048	50–100	умеренный/хороший	30–40 %	лососево-оранжевые
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	ингибирован	0 %
Shigella flexneri ATCC 12022	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	зеленовато-синие
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	умеренный	20–30 %	оранжевые (возможен осадок желчных солей)

Ограничения и предостережения

Продолжительная инкубация улучшает дифференциацию между Salmonella и Shigella. Виды Proteus могут напоминать Salmonella или Shigella, поэтому требуется дополнительное подтверждающее тестирование.
Среда является селективной и должна использоваться в сочетании с другими питательными средами.
Некоторые виды Salmonella являются лактозоположительными или H₂S-отрицательными и не идентифицируются на данной среде. Для полного подтверждения следует использовать биохимические, серологические тесты или хромогенные среды (M2116).

Условия эксплуатации и хранения

Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Утилизация использованных или непригодных препаратов должна осуществляться путем автоклавирования и/или сжигания. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат деконтаминации в соответствии с установленными лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.