Питательная селективная агаризованная среда HiMedia M467-100G Агар Хектоена энтерик предназначена для выделения видов Shigella и Salmonella из кишечных патологических образцов. Среда применяется при исследовании клинических образцов, пищевых продуктов и воды, при этом подтверждение видов Proteus, сходных с Salmonella или Shigella, требует дополнительных тестов.

Назначение и область применения

Агар Хектоена энтерик рекомендован для выделения видов Shigella и Salmonella из кишечных патологических образцов.

Типы образцов:

• Клинические образцы: моча, фекалии.
• Пищевые продукты.
• Вода.

Среда применяется как одна из нескольких посевных сред для культивирования представителей семейства Enterobacteriaceae из образцов кала. Пищевые продукты, содержащие мясо птицы, яйца или молочные компоненты, являются наиболее частыми источниками пищевого сальмонеллёза; агар Хектоена энтерик может использоваться как часть многоэтапных процедур выделения Salmonella.

Состав

Состав на 1 л среды:

• Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2.
• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среды, обеспечивающие выделение более широкого спектра кишечных патогенов, обычно оказывают менее выраженное ингибирующее действие на представителей непатогенной кишечной флоры.

Агар Хектоена энтерик разработан в 1967 году King и Metzger из Института Хектоена для повышения частоты выделения микроорганизмов родов Shigella и Salmonella по сравнению с их выделением на других средах, широко применявшихся в клинических лабораториях того периода.

Дезоксихолат натрия заменён желчными солями в пониженной концентрации. Это обеспечивает рост Shigella, а также представителей рода Salmonella. Концентрация пептона повышена для компенсации ингибирующего действия желчных солей.

Повышенное содержание углеводов и протеозопептона снижает ингибирующее действие желчных солей и индикаторов, обеспечивая хороший рост видов Salmonella и Shigella при подавлении нормальной кишечной флоры.

Среда содержит три углевода — лактозу, сахарозу и салицин — для дифференциации кишечных патогенов. Повышенная концентрация лактозы облегчает визуализацию кишечных патогенов и уменьшает вероятность ошибок, связанных с замедленной ферментацией лактозы. Салицин ферментируется многими колиформными бактериями, включая микроорганизмы, не ферментирующие лактозу и сахарозу.

Сочетание цитрата аммония железа и тиосульфата натрия позволяет выявлять образование сероводорода H₂S. Это способствует дифференциации микроорганизмов по формированию колоний с чёрным центром.

Индикаторная система, состоящая из кислотного фуксина и бромтимолового синего, обладает меньшей токсичностью по сравнению с индикаторными системами других кишечных сред, что способствует выделению кишечных патогенов.

Добавление новобиоцина в концентрации 15 мг/л повышает селективность среды и подавляет виды Citrobacter и Proteus. Среда также используется для дифференциации патогенных кишечных микроорганизмов и обеспечения лучшего роста представителей рода Shigella.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 76,67 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика посева и инкубации

1. Инокулируйте среду свежими фекалиями, суспендированными в растворе Рингера, либо непосредственно ректальными тампонами.
2. Распределите посевной материал по поверхности среды для получения изолированных колоний.
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
4. Дополнительная инкубация улучшает дифференциацию между Salmonella и Shigella.
5. Виды Proteus могут иметь сходный вид с Salmonella или Shigella, поэтому для подтверждения необходимо провести дополнительные тесты.

Пробоподготовка, обращение с образцами и безопасность

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими руководствами.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности при обращении с клиническими образцами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Дополнительная инкубация улучшает дифференциацию между Salmonella и Shigella. Виды Proteus могут иметь сходный вид с Salmonella или Shigella, поэтому для подтверждения необходимо проводить дополнительные тесты.
2. Поскольку среда является селективной, её необходимо использовать в сочетании с другими питательными средами.

Контроль качества

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид

Порошок от кремового до жёлтого цвета, с желтовато-коричневым оттенком, однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.

Реакция

Реакция 7,67%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,5 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источ