HiMedia M456-100G Агар с дрожжевым экстрактом

Питательная агаровая среда HiMedia M456-100G Агар с дрожжевым экстрактом — порошковая среда для определения общего количества микроорганизмов в воде, требующая 23,0 г на 1 л очищенной или дистиллированной воды. Среда предназначена для количественного посева водных проб с раздельным подсчётом колоний после инкубации при 35 °C в течение 24 ч и при 20–22 °C в течение 3 суток.

Назначение

Питательная среда предназначена для чашечного подсчёта микроорганизмов в образцах воды.

Тип образца

Водные пробы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным эксплуатационным параметрам.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар с дрожжевым экстрактом приготовлен по формуле, описанной Windle Taylor, для чашечного подсчёта микроорганизмов в воде. Вода может содержать большое количество микроорганизмов, в частности поступающих из почвы и растительности.

Дрожжевой экстракт и пептон обеспечивают наличие азотсодержащих соединений, витаминов группы B и других питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов.

Из образца воды готовят ряд десятикратных разведений с использованием раствора Рингера M525, затем вносят аликвоты в две параллельные серии чашек. Расплавленную и охлаждённую до 45 °C среду разливают в чашки с пробой и гомогенизируют с образцом.

Одну серию чашек инкубируют при 35 °C в течение 24 ч, вторую серию — при 20–22 °C в течение 3 суток. Отдельно подсчитывают микроорганизмы, образующие видимые колонии через 24 ч при 35 °C, и микроорганизмы, образующие колонии через 3 суток при 20–22 °C. Для подсчёта выбирают чашки, содержащие 30–300 колоний.

Методика приготовления среды и проведения анализа

1. Суспендируйте 23,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; указанное производителем давление 15 psi соответствует приблизительно 0,103 МПа или 1,03 бар.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду и разлейте её в стерильные чашки Петри.
6. Подготовьте из водной пробы ряд десятичных разведений с раствором Рингера M525.
7. Внесите аликвоты разведённой пробы в две параллельные серии чашек.
8. Добавьте расплавленную среду, охлаждённую до 45 °C, и гомогенизируйте её с пробой.
9. Инкубируйте одну серию чашек при 35 °C в течение 24 ч.
10. Инкубируйте вторую серию чашек при 20–22 °C в течение 3 суток.
11. Отдельно подсчитайте видимые колонии, сформированные через 24 ч при 35 °C, и колонии, сформированные через 3 суток при 20–22 °C.
12. Для подсчёта используйте чашки с 30–300 колониями.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M456-100G
• Назначение изделия: агаровая питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: животное
• Расход среды: 23,0 г/л
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Реакция: 2,3 % м/об водного раствора при 25 °C
• Условия гелеобразования: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5%-ного агара

Приготовленная среда

• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,2 ± 0,2 для 2,3 % м/об водного раствора при 25 °C.
• Гелеобразование: плотное, сопоставимое с 1,5%-ным агаровым гелем.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее организм обозначался как Enterobacter aerogenes.

Сбор, обращение с образцами и безопасность

Для водных проб применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

При работе с образцами и культурами:

• прочитайте маркировку перед открытием контейнера;
• используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица;
• соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории;
• применяйте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с образцами;
• при необходимости руководствуйтесь указаниями в соответствующих паспортах безопасности.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения применения

• Из-за различий в пищевых потребностях отдельных микроорганизмов некоторые штаммы могут расти слабо.
• При чрезмерно высокой посевной нагрузке характерный блеск колоний может быть подавлен.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотное, сопоставимое с гелем 1,5%-ного агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Ожидаемые эксплуатационные характеристики: среда должна демонстрировать заявленные характеристики при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое вентилируемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• После открытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон после каждого использования.
• Назначение плотного закрывания: предотвращение образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• При неправильном хранении возможно образование комков.
• После использования контейнер необходимо плотно закрыть.
• Среду следует использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных приготовленных сред посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами работы лаборатории.